人外周血嗜碱性白血病细胞的应用

背景^[1-3]

人外周血嗜碱性白血病细胞是从一位慢性髓性白血病患者暴发期的外周血建立了KU812细胞株。这些细胞至少有一个Ph1(费城)染色体。这株细胞有一些嗜碱性细胞的标记(如Fc受体，碱性颗粒，生成组胺)，而淋巴标记阴性。

白细胞是血液中的一类细胞，当病菌侵入人体体内时，白细胞能通过变形而穿过毛细血管壁，集中到病菌入侵部位，将病菌包围﹑吞噬。如果体内的白细胞的数量高于正常值，很可能是身体有了炎症。人体中正常成熟的白细胞可以分为五类：嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞。

人外周血嗜碱性白血病细胞

嗜碱性粒细胞是白细胞的一种，起源于骨髓造血多能干细胞，在骨髓内分化成熟后进入血流。嗜碱性粒细胞胞体呈圆形，直径10～12μm。胞质紫红色内有少量粗大但大小不均、排列不规则的黑蓝色嗜碱性颗粒，常覆盖于核面上。胞核一般为2～3叶，因被颗粒遮盖，核着色较浅。嗜碱性粒细胞数量增多多见于某些过敏性疾病、某些血液病、某些恶性肿瘤以及某些传染病等。

应用^[4][5]

用于慢性粒细胞白血病患者嗜碱性粒细胞的新探索研究

选择经血液学,骨髓象,染色体及分子学检查,确诊为慢性粒细胞白血病慢性期,干扰素α治疗有效,干扰素α治疗无效加速期或急变期的患者,分为三组,利用Ficoll密度梯度离心法分离三组患者骨髓单个核细胞,再将所得细胞利用聚蔗糖-泛影葡胺法（polyglucosan-diatrizoate）进行形态学意义上的“嗜碱性粒细胞”的分离,涂片染色,倒置显微镜及光镜观察细胞形态,进行嗜碱性粒细胞计数的统计学检验。

利用包被了FcεRI单克隆抗体的磁珠进行免疫磁珠分选,对细胞进行进一步的纯化。之后,将所得细胞以浆细胞样树突状细胞的表型进行流式细胞仪检测,对比三组患者中所谓的“嗜碱性粒细胞”具有浆样树突状细胞表型的比例,做统计学检验判断其显著性。

结果：CML-MNC在经过聚蔗糖-泛影葡胺法分离后,嗜碱性粒细胞纯度达到90%以上,瑞氏-吉姆萨染色光镜下可见直径10-14μm的单个核细胞,其细胞核内包含有浓缩的染色质,这种细胞核,我们形象的称之为“三叶草”或“奶油糕点”,胞核分叶不清楚,胞质含形状不规则、大小不等的嗜碱性颗粒。其中,急变期组或干扰素治疗无效组“嗜碱性粒细胞”计数明显较慢性期组与干扰素治疗有效组明显增加。

流式细胞仪检测细胞表面标志,在这种形态学认定的“嗜碱性粒细胞”中发现具有一定数量的表达pDC表面标志的细胞,而该种标志又与国际公认的嗜碱性粒细胞的标志有着明显的区别。随着疾病进展,该种表达pDC表面标志的细胞含量明显减少。不同的疾病进展期,所占数量不同,差异有统计学意义（P＜0.05）。

参考文献

[1]IPC:Professional Type 1 Interferon-Producing Cells and Plasmacytoid Dendritic Cell Precursors[J].Yong-Jun Liu.Annual Review of Immunology.2005

[2]Chronic myeloid leukemia:Pathophysiology,diagnostic parameters,and current treatment concepts[J].Christian Sillaber,Matthias Mayerhofer,Hermine Agis,Verena Sagaster,Christine Mannhalter,Wolfgang R.Sperr,Klaus Geissler,Peter Valent.Wiener Klinische Wochenschrift.2003(13)

[3]Risk assessment for patients with chronic myeloid leukaemia before allogeneic blood or marrow transplantation[J].A Gratwohl,J Hermans,JM Goldman,W Arcese,E Carreras,A Devergie,F Frassoni,G Gahrton,HJ Kolb,D Niederwieser,T Ruutu,JP Vernant,T de Witte,J Apperley.The Lancet.1998(9134)

[4]Inhibition of the ABL Kinase Activity Blocks the Proliferation of BCR/ABL+Leukemic Cells and Induces Apoptosis[J].Carlo Gambacorti-Passerini,Philipp le Coutre,Luca Mologni,Mirco Fanelli,Carla Bertazzoli,Edoardo Marchesi,Massimo Di Nicola,Andrea Biondi,Gian Marco Corneo,Daniela Belotti,Enrico Pogliani,Nicholas B.Lydon.Blood Cells,Molecules and Diseases.1997(3)

[5]李海鹰.慢性粒细胞白血病患者嗜碱性粒细胞的新探索[D].兰州大学,2008.