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人胰多肽(PP)ELISA KIT的应用

发布日期:2020/5/14 10:33:41

背景[1-3]

人胰多肽(PP)ELISA KIT应用双抗体夹心法测定标本中人胰多肽(PP)试剂盒水平。用纯化的人胰多肽(PP)试剂盒抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入胰多肽(PP)试剂盒,再与HRP标记的胰多肽(PP)试剂盒抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的胰多肽(PP)试剂盒呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人胰多肽(PP)试剂盒浓度。

胰多肽(panoreatio polypeptide,PP)是36个氨基酸组成的直链多肽激素,由胰腺的PP细胞分泌。PP细胞受餐后食物中蛋白质的作用,蛋白质是刺激PP分泌的最强因素,其次是脂肪、糖类。PP的释放均为迷走-胆碱能依赖性的,受迷走神经调节并可被迷走神经干切除术和抗胆碱能药物所抑制。十二指肠酸化、内源性CCK释放,可以作为刺激PP释放的主要激素,使PP值显著升高。胰岛素使PP升高是通过低血糖兴奋迷走神经所致。生长激素可抑制PP释放和餐后PP水平。

PP具如下生理效应:①抑制胆囊收缩素和胰酶的排放,使胆囊平滑肌松弛,可降低胆囊内的压力,胆总管括约肌紧张加强,抑制胆汁向十二指肠的排放。②各种食物进人小肠对PP释放有刺激作用,PP的生理作用是抑制餐后胰液和胆汁分泌,对胰泌素和胆囊收缩素等外源性促胰腺分泌的作用,PP均为较强的抑制剂。③PP对胃肠道有广泛作用,对五肽胃泌素引起的胃酸分泌的抑制作用。④PP抑制血浆胃动素的分泌,增加食管下括约肌的压力,抑制胃体部肌电活动。

应用[4][5]

用于人胰多肽核酸适配体的筛选及应用

人胰多肽(pancreaticpolypeptide,PP)是经胰腺PP细胞分泌的一种由36个氨基酸残基组成的多肽激素。人胰多肽是无功能性胰腺神经内分泌肿瘤的特异性标志物,具有重要的临床价值。目前临床上检测人胰多肽最常用的方法为放射免疫法。该方法虽然灵敏度高、特异性强,但具体的实验操作较为复杂,不仅需要制备抗体及放射标记的抗原,还需要特殊的仪器和实验场地。虽然文献中也有报道通过液相色谱-质谱联用的方法来检测人胰多肽,避免了抗体及放射性抗原的制备,但仍然需要大型精密仪器及专业的实验人员。因此,发展快速、简便的人胰多肽检测方法仍然值得研究者去努力。核酸适配体是一种新兴的亲和探针,可与目标物高亲和力、高特异性地结合。核酸适配体易于合成及修饰、稳定性好、亲和力高、分子量低,目前已被用于构建小分子、蛋白质、细胞等分析物的检测方法。

参考文献

[1]Utility of chromogranin A,pancreatic polypeptide,glucagon and gastrin in the diagnosis and follow‐up of pancreatic neuroendocrine tumours in multiple endocrine neoplasia type 1 patients[J].Wei Qiu,Ioannis Christakis,Angelica Silva,Roland L.Bassett Jr,Liyun Cao,Qing H.Meng,Elizabeth Gardner Grubbs,Hua Zhao,James C.Yao,Jeffrey E.Lee,Nancy D.Perrier.Clinical Endocrinology.2016(3)

[2]Aptamer based peptide enrichment for quantitative analysis of gonadotropin-releasing hormone by LC–MS/MS[J].S.L.Richards,A.T.Cawley,R.Cavicchioli,C.J.Suann,R.Pickford,M.J.Raftery.Talanta.2016

[3]Graphene oxide–gold nanoparticles hybrids-based surface plasmon resonance for sensitive detection of microRNA[J].Qing Wang,Qing Li,Xiaohai Yang,Kemin Wang,Shasha Du,Hua Zhang,Yajie Nie.Biosensors and Bioelectronics.2016

[4]Surface plasmon resonance biosensor for enzyme-free amplified microRNA detection based on gold nanoparticles and DNA supersandwich[J].Qing Wang,Rongjuan Liu,Xiaohai Yang,Kemin Wang,Jinqing Zhu,Leiliang He,Qing Li.Sensors&Actuators:B.Chemical.2016

[5]覃诗雅.人胰多肽核酸适配体的筛选及应用[D].湖南大学,2017.

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