无花果酶的制备与应用

背景及概述^[1][2]

无花果酶属于蛋白水解酶，主要存在于无花果树树胶、无花果青果和叶中。无花果酶是含多种组分的复合酶。无花果酶与木瓜蛋白酶、菠 萝蛋白酶类似，属于巯基蛋白酶，其活性中心部位含有必需的巯基， 能为半胱氨酸等多种还原剂激活。无花果酶能以广泛的专一性水解各种天然 蛋白质及合成底物的肽键、脂键和酰胺键。可用于食品工业的面点改 良、肉类软化、乳制品凝固；畜牧业营养饲料的改良剂；在医药工业 方面，作为消炎剂、消化促进剂、驱虫剂等；同时也是生命科学研究 中的常用试剂。因此，无花果酶具有巨大的应用潜力。

制备^[2]

选新鲜无花果青果100g洗净，加入200mL 0.9％含5mM EDTA 和5mM Cys的NaCl溶液，匀浆，浸泡3小时，除渣过滤，6000rpm 离心10分钟，向上清液中缓缓加入鞣酸溶液至终浓度为0.2％，4℃ 放置2小时，6000rpm离心10分钟后，弃上清液，收集沉淀用pH7.0， 0.1M含5mM EDTA和5mM Cys的磷酸缓冲液溶解，6000rpm离心 10分钟，弃去上清液，重复两次，用30mL pH7.0，0.1M含5mM EDTA 和5mM Cys的磷酸缓冲液溶解，冷冻干燥，获得无花果酶粉。

固定化^[3]

对无花果酶进行固定化可以避免其在酸碱和有机溶剂中失活,实现酶的反复利用,在医药上用固定化的无花果酶可以减小其副作用。常用的固定化,方法有吸附、载体交联和包埋法等。刘德富等人采用几丁质作为载体,通过甲酸和戊二醛共价偶联无花果酶,重复水解酪蛋白 7 次后,固定化酶保持原酶活性的59 .1 %。又以戊二醛活化载体,将无花果酶共价结合到聚苯乙烯阴离子交换树脂GM201 上固定化,得到的固定化酶重复水解酪蛋白 7 次后, 保持原活性的83 .3 %。现在人们也不断的开发新型的固定化载体和新方法,并取得了较好的效果。任维栋等人将 Sephadgx G-200 与对β-硫酸酯乙碱基苯胺(SESA)首先醚化制备对氨基苯矾乙基麦联萄求糖(ABSE-Sephadex G-200),然后经重氮化固定无花果酶, 酶活力回收达69 % 。

应用^[3]

《Food Processing》报道, 无花果酶可抑制水果发生褐变,所以可以用作蔬菜、水果、虾等天然食品的保鲜剂。另外, 无花果酶具有较强的蛋白水解能力、凝乳、解脂和溶菌活力,是能作用于各种蛋白质的纯天然物质。具有耐高温、活性强、稳定性高等特征,对 pH的变化和金属离子及去垢剂不敏感,在医药、食品、轻工、化妆品、饲料和生命科学研究方面有广泛的应用。主要用于肉类的嫩化、乳液的凝固剂、焙烤食品添加剂、啤酒抗旱等, 也可作为杀虫剂和化妆品的添加剂等。

主要参考资料

[1] 化学物质辞典

[2] [中国发明,中国发明授权] CN200610163292.6 一种无花果蛋白酶的制备方法

[3] 郭冬青,纪付江,程绍杰,宋淑亮.无花果蛋白酶的研究进展[J].北方园艺,2010(07):210-211.