四草酸钾

四草酸钾，化学名又称之为草酸三氢钾、乙二酸三氢钾、四乙二酸钾；英文名为potassiumtrihydrogendioxalatedehydrate或potassiumtetraoxalate。纯品为无色晶体或白色粉末。加热至100℃失水成无水物，更高温度时分解为碳酸钾和一氧化碳等，能溶于水，微溶于醇。国产分析纯的四草酸钾，目前的市场价位为120～150元/Kg。进口优级纯的四草酸钾，市场价位为1568～1850元/Kg。 目前四草酸钾的制备，是由过量草酸与碳酸钾或氯化钾等钾盐进行化学反应制得。化学反应生产四草酸钾，其副产物盐酸、草酸给环境带来污染；过量的草酸增加了环境危害；使用碳酸钾、氯化钾作为反应基质，在生产碳酸钾、氯化钾的同时给环境造成了二次污染，使得四草酸钾的生产成本高。但利用微生物生产四草酸钾，还未见报道。

一种黑曲霉发酵生产四草酸钾的方法，该方法包括如下步骤：

a、黑曲霉的分离纯化：选取皱边石杉植株的茎段，经流水冲洗2-3小时→75％酒精消毒1-2min→0.01mol/L盐酸、5％次氯酸钠、2.4mmol/L柠檬酸依次冲洗一遍→5％次氯酸钠消毒10～12min→无菌水冲洗3-5次→10％双氧水消毒8-12min→无菌水冲洗4～5次→无菌吸水纸上吸干表面水→接种于PDA平板上→分离、纯化得到黑曲霉。

b、黑曲霉的液体发酵培养：每升PDA液体培养基，加入蔗糖5～25g，pH值调节至4.7～6.4，无菌状态下，接种黑曲霉孢子，黑曲霉孢子加入量为1升PDA培养液加1％(体积)黑曲霉孢子，孢子浓度为1×104～106cfu/mL、培养温度为30～40℃，转速为120～150转/分钟，通空气量为培养液总体积即PDA培养液、蔗糖和黑曲霉孢子接种量的总和的30％，恒温发酵培养72-100小时，过滤菌丝，发酵液浓缩至培养液总体积的1/20～1/15，析出结晶，超纯水洗涤4～5次，40～50℃烘干，得四草酸钾产品。