480-10-4

用于含量测定/鉴定/药理实验等。
药理药效:调节体内血糖，增强肌体免疫力，促进生长，提高肌体抗氧化能力。

百蕊草为檀香科植物百蕊草（ThesiumChineseTurcz.）或其变种长梗百蕊草（ThesiumChineseTurcz.Var.longipedunculatum Chu）的干燥全草，其味辛、微苦、性寒，具有清热、利湿、解毒之功效，主治风寒感冒、中暑、淋巴结核和黄疸等症。百蕊草的主要有效成分为黄酮类化合物，其中紫云英苷为黄酮中的代表性成分。同时紫云英苷也是杜仲叶中活性成分之一，杜仲（eucommiaulmoies）是杜仲科杜仲属植物，以皮入药，是我国常用的名贵滋补中药，神农本草经将杜仲列为上品，具有补中益气坚筋骨强志安胎 久服轻身耐老之功效 杜仲皮的资源紧缺，以杜仲叶代替杜仲皮作药用的研究日益活跃，研究表明杜仲叶与皮化学成分基本相同，药理效应亦相同。另外，荷叶的活性成分中也含有紫云英苷等，主要用于神经衰弱、神经衰弱综合症及镇静、催眠等症，能够抗惊、镇痛及降体温，对心律失常有对抗作用，可降低血脂和调理血脂蛋白而抑制动脉粥样硬化的形成和发展。
紫云英苷化学名为山柰酚-3-葡萄糖苷，是广泛存在于药用植物中的一种天然类黄酮化合物，具有显著的具有抗炎、抗氧化、强心、镇痛、抗菌、抗过敏、抗肝毒作用，并能增强机体抵抗力、刺激干扰素的产生、抗心律失常、扩张血管、保护心肌等作用，还具有修复受损DNA、以及对体外TNF-α，IL-1β和IL-6的生成有抑制效应等。

通用名称：紫云英苷
英文名称：Astragalin           
化学名：5,7-Dihydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-3-[(2S,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-trihydroxy
-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxychromen-4-one 
别名：紫云英甙、黄芪苷、莰非醇-3-O-葡萄糖苷、百蕊草素Ⅱ
Cas No：480-10-4     
分子量：448.38
分子式：C21H20O11
结构式：

紫云英苷是广泛存在于药用植物中的一种天然类黄酮化合物，具有抗炎、抗 氧化、强心、镇痛、抗菌、抗过敏、抗肝毒作用，并能增强机体抵抗力、刺激干 扰素的产生、抗心律失常、扩张血管、保护心肌等作用。其部分活性具体如下：
1. 抑菌活性：荷叶紫云英苷对供试菌的生长抑制作用如下表所示： 由上表可知，荷叶紫云英苷对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、根霉、黑曲霉和酿酒酵母的抑菌圈直径分别为23.2 mm，19.3 mm， 20.4 mm，15.3 mm，16.2 mm，15.1 mm和13.7 mm。由此可以看出荷叶紫云英苷对细菌、霉菌和酿酒酵母都有很强的抑制效果，其抗菌谱较宽。
2. 对成骨细胞的增殖和碱性磷酸酶活性的影响：MC3T3-E1细胞是从新生C57BL/6小鼠颅顶骨中分离培养而建立起的成骨细胞珠，其增殖稳定可无限传代，并具有ALP活性I型胶原合成等成骨细胞生物学特性，该细胞株已成为研究药物对成骨细胞影响的有重要价值的体外细胞模型。
1）紫云英苷对MC3T3-E1细胞增殖的影响：浓度为2.2×10-4mol/L、2.2×10-5mol/L、2.2×10-6mol/L均能明显的促进MC3T3-E1细胞增殖（P＜0.05）， 其中在浓度为2.2×10-5mol/L时作用最强，且差异具有高度的统计学意义（P＜0.01）。
2）紫云英苷对MC3T3-E1细胞分化的影响：细胞给药后培养48h，MC3T3-E1细胞在2.2×10-4mol/L、2.2×10-5mol/L的紫云英苷给药组ALP活性增强，且具有极显著差异（P＜0.01），细胞给药后培养72h，与空白对照组相比，各浓度组ALP活性无显著性差异（P＜0.05）。

血浆药物浓度经DAS（drugandstatistics，version2.0）软件程序处理，用房室模型估算主要药代动力学参数，大鼠灌胃给药后在0.5±0.1h达到231.1±67.3ng/ml的峰值浓度，血浆半衰期为3.9±1.3h，AUC0-∞为782.6±152.8(ng•h/ml)，其他数值结果见表：

方法1：采用RP - HPLC 测定百蕊草中紫云英苷的含量
1）色谱条件：Diamonsil C18 色谱柱（4.6 mm×250 mm, 5μm）；流动相乙腈-水（23∶77），用冰醋酸调 pH 3.85；流速1.0 mL/min；柱温为常温；检测波长346nm；在选定的色谱条件下，理论塔板数按紫云英苷计算不低于2500，分离度大于1.5，拖尾因子在0 .95～1.05，如下图： 2）对照品溶液的制备：精密称取干燥至恒重的紫云英苷对照品10.30mg，置 10 mL量瓶中，加乙醇溶解至刻度，摇匀，制成 1. 030 mg/mL的对照品溶液。
3）供试品溶液的制备：取干燥的百蕊草细粉1.0 g，精密称定，加入50% 乙醇 100 mL，回流提取 2次，第 1次1.0 h，第2次0.5 h，滤过，2 次滤液合并，浓缩至干，残渣用 50% 乙醇定容至10 mL，摇匀，经 0.45μm微孔滤膜滤过， 即得。
4）结果：测定了同一产地不同批次的百蕊草药材，紫云英苷质量分数在 0.120%～0.155 %。
方法2：采用液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）测定大鼠血浆中紫云英苷的浓度。
1）色谱条件：色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18分析柱（150mm×4.6mm，5μm），流动相为甲醇-10mmol/L醋酸铵水溶液-甲酸（80∶20∶0.15，v/v/v），流速为0.6ml/min，柱温为30℃，进样体积为20μl。
2）质谱条件离子化方式：电喷雾；扫描方式：多反应监测；离子极性：紫云英苷选择正离子，内标槲皮素为负离子监测；驻留时间：200ms；毛细管电压：4.0kV；雾化气温度：300℃；雾化气流速：10L/min；雾化气压力：30psi。检测对象：紫云英苷，[M+H]+，m/z449.1→m/z287.1，裂解电压110V，碰撞能量8eV；槲皮素，[M-H]-，m/z301.1→m/z151.1，裂解电压135V，碰撞能量25eV
3）溶液配制
对照品溶液：准确称取紫云英苷对照品10.1mg于10ml容量瓶中，用甲醇溶解定容至10ml，得浓度为1.00mg/ml的紫云英苷对照品储备液；然后依次用乙腈稀释成浓度分别为1.00、3.00、10.0、30.0、100、300、1000ng/ml紫云英苷标准曲线溶液。
内标溶液：准确称取槲皮素对照品10.1mg于10ml容量瓶中，用甲醇溶解并定容至10ml，得浓度为1.00mg/ml的槲皮素内标储备液；用乙腈稀释成浓度为1000ng/ml的槲皮素内标工作溶液。
4）紫云英苷在1.00~1000ng/ml浓度范围内线性关系良好（r2=0.9929）；定量下限为1.00ng/ml；低、中、高浓度的提取回收率均大于93%。

以荷叶为原料，研究了超声波提取荷叶紫云英苷：试验结果表明，低频超声波（25.5 kHz）的提取效果较好，通过L9（34）正交试验得出超声波辅助提取荷叶紫云英苷的最佳提取工艺：超声波频率为低频（25.5 kHz），提取时间为20 min，提取温度为55 ℃，提取溶剂为体积分数70%乙醇。试验条件下荷叶紫云英苷提取率为1.67%。

配制低浓度（3.00ng/ml）和高浓度（900ng/ml）紫云英苷标准血浆样品数份，考察在不同条件下的稳定性。结果表明，血浆样品经室温放置2h稳定（RE在 5.0%~6.3%之间）；血浆样品经沉淀蛋白处理后室温放置8h稳定（RE在-2.4%~3.5%之间）；血浆样品经历3次冷冻-解冻循环稳定（RE在-0.7%~6.4%之间）；血浆样品-20℃放置23d稳定（RE在-1.1%~6.8%之间）。

一种酶促合成紫云英苷的方法，步骤如下：
1）克隆、表达和纯化紫云英苷在合成途经中所需关键酶：包括糖原磷酸化酶GP、葡萄糖焦磷酸化酶GalU、黄烷酮-3-羟化酶F3H、黄烷酮合酶FLS1和类黄酮3-O-葡萄糖基转移酶UGT78K2；
2）肌糖原Gn在GP作用下合成葡萄糖-1-磷酸G-1-P；
3）G-1-P在GalU作用下合成尿苷二磷酸葡萄糖UDPG；
4）柚皮素NRN在F3H作用下合成二氢山奈酚DHK；
5）DHK在FLS1作用下合成山奈酚KMF；
6）KMF和UDPG在UGT78K2作用下合成紫云英苷。
本发明步骤少、操作条件温和、副产物少、得率高、无污染、生产成本显著降低。

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[3] 纪晓花. 荷叶紫云英苷的超声辅助提取及其抑菌活性研究.食品工业. 2014,35(10):112-114. 
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