P 22077

P22077是一种ubiquitin-specific protease USP7（泛素特异性蛋白酶USP7）抑制剂，EC50为8.6 μM，也抑制USP47。 P22077是最近发现的USP7抑制剂P5091的类似物。在实验浓度范围内，P22077对 DEN1 和 SENP2core几乎没有作用活性，但抑制 USP7，IC50为8 μM。 在体外，P22077抑制一组DUBs, 半胱氨酸蛋白酶，和其他家族蛋白水解酶，说明P22077抑制USP7和其紧密相关的DUB USP47。15-45 mM P22077 作用于细胞裂解液，抑制一小部分DUBs。P22077 诱导肿瘤细胞死亡，EC50为低的微摩尔范围。不同于广泛的特异性抑制剂，P22077在泛素化蛋白水平的抑制效果发生改变。P22077处理G1/S期的U2OS细胞，诱导羟基脲的产生，导致Claspin蛋白减少，这种作用具有剂量依赖性，随之磷酸丝氨酸317 Chk1减少。而且, P22077处理细胞后，定量MS说明E3泛素连接酶组分RBX1, DCAF7, DCAF11, 和 DNA 损伤结合蛋白1(DDB1) 减少。

1. 在冰浴中冷却的发烟硝酸（24 mL）中分批加入2-乙酰基-5-氯噻吩（4.00 g，24.8 mmol）。 2. 将反应混合物在室温下搅拌30分钟，然后倒入200 mL冰水中。 3. 沉淀出的固体用乙醚萃取，有机相经干燥、过滤后，真空浓缩得到粗产物1-(5-氯-4-硝基噻吩-2-基)乙-1-酮（4.50 g，黄色固体），无需进一步纯化。 4. 将2,4-二氟苯硫酚（4.30 g，29.4 mmol）加入到甲醇钠（1.40 g，26.3 mmol）的甲醇（250 mL）溶液中。 5. 混合物在室温下搅拌20分钟后，加入粗产物1-(5-氯-4-硝基噻吩-2-基)乙-1-酮（5.50 g）。 6. 将混合物搅拌过夜后，加入水（250 mL），过滤收集形成的固体，并在40℃下真空干燥。 7. 产物通过乙腈重结晶两次，得到白色固体1-(5-((2,4-二氟苯基)硫基)-4-硝基噻吩-2-基)乙酮（3.30 g，39%收率）。 8. 1H NMR (300 MHz, DMSO) δ 8.50, 8.00, 7.97, 7.95, 7.9, 7.71, 7.70, 7.68, 7.67, 7.65, 7.64, 7.43, 7.40, 7.37, 2.50。

参考文献：

[1] Medicinal Chemistry letters, 2012, vol. 3, # 10, p. 789 - 792,4

[2] ACS Medicinal Chemistry Letters, 2012, vol. 3, # 10, p. 789 - 792

[3] Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, 2017, vol. 27, # 4, p. 845 - 849