腺苷5'-三磷酸二钠三水合物价格
腺苷5'-三磷酸二钠三水合物 更多供应商 51963-61-2 腺苷5'-三磷酸二钠三水合物 价格
性状
本品为白色结晶或类白色粉末,无臭,略有酸味;有引湿性。在水中易溶,在乙醇、乙醚、氯仿及苯中极微溶解。碱性溶液中较稳定,酸性及中性溶液中易分解。受热也易分解。
所属类别
生物化学品: 核酸类: 核苷酸及其衍生物
用途与作用
用于心肌梗死及脑溢血时,应在发病后2-3周开始应用。副反应较少;静注宜慢。
合成工艺与制法
方法一、以免肉为原料
兔肉松的制备 将冰冻过的兔体迅速去骨后绞碎,加入3-4倍量的95%乙醇,搅拌30min后过滤,制成肉糜,再加入2-2.5倍的乙醇重复上述操作,将肉糜置于乙醇中,加热煮沸5min,取出并迅速置于冷却的乙醇中降温至10℃以下,过滤并压干,将肉饼捣碎后冷风吹干制得兔肉松。
兔肉[绞碎]→[冰浴]肉糜[95%冷乙醇]→[30min]变性肉糜[95%乙醇]→[煮沸5min]肉饼[捣碎,吹干]→[<10℃]肉松
提取、吸附、洗脱 将肉松加入4倍量的蒸馏水,搅拌30min,过滤压成肉饼,捣碎后再加3倍量的蒸馏水重复上述操作,将两次的滤液合并,加入总体积4%的冰醋酸,用6mol/L盐酸调pH为3,冰浴冷却后过滤,滤液经阴离子交换树脂吸附,用pH3、0.03 mol/L氯化钠溶液洗涤柱上滞流的AMP、ADP及无机盐等至薄层层析检查无AMP、ADP斑点而有ATP斑点出现时,再用pH 3.8、1mol/L氯化钠液洗脱ATP,收集洗脱液,为防止ATP的水解,上述过程应在0-10℃进行。
$S001$S
除热原及杂质、结晶、干燥 洗脱液用0.6%的硅藻土和0.4%的活性炭除去热原及杂质,然后用6mol/L盐酸调pH为2.5-3,在28℃恒温水浴中加 3-4倍量的95%乙醇,使ATP-二钠盐结晶,收集结晶,干燥,得ATP成品。
ATP洗脱液[硅薄土,活性炭]→[10min]滤液[乙醇]→[pH2.5-3, 28℃]ATP成品
方法二、光合磷酸化法
叶绿体混悬液的制备 新鲜菠菜叶7kg,用水洗净后加入Tris缓冲液10L,搅碎后离心,即得。
新鲜菠菜叶[Tris缓冲液]→[捣碎3min,离心]叶绿体混悬液
肌激酶的制备 将乙二胺四乙酸钠27.9g和氢氧化钠63g加冷蒸馏水溶解后,稀释,至37.5L。取家兔肌肉,浸入冰块中,搅碎成肉浆,加入等体积的乙二胺四乙酸钠-氢氧化钠溶液,搅拌提取10min,离心,取上清液,加入总体积的0.05倍的2mol/L盐酸,水浴加热至90℃,保温3min后,置冰浴中降温至20℃,加2mol/L氢氧化钠调pH至6.5,离心,取上清液装瓶密封,冰箱冷冻保存。
兔肉[乙二胺四乙酸钠,氢氧化钠]→[10min]肌激酶
光合反应 将磷酸氢二钠150g用2L蒸馏水溶解后,再加入Tris50g、 AMP55g,搅拌使其溶解,加水稀释至4L,加6mol/L盐酸调pH至7.8-7.9。将该溶液与含ATP55g的0.308%二氮蒽甲硫酸盐溶液50ml及肌激酶250ml的混合溶液混合,加入叶绿体混悬液中,保持pH7.9-8,开始进行光照,光照时保持温度为18℃左右,至反应终点(约1.5h)时停止照光,稍冷却,搅拌下加入40%三氯乙酸凝固蛋白,过滤,上清液作进一步处理。
5'-AM[磷酸氢二钠,Tris, 二氮蒽甲硫酸]→[10min]混合液[碘钨灯,光照]→[pH8, 18℃]反应液[40%三氯乙酸]→[<10℃]上清液
三磷酸腺苷二钠的提取
汞盐法提取 上清液搅拌下加入硝酸汞溶液500ml(重量比为硝酸汞:硝酸:蒸馏水=2.5:0.9:2的混合溶液)静置1h,过滤,滤饼用冷蒸馏水洗涤后加1.1L蒸馏水,成细浆状混悬液,冰浴冷却,使温度降至3℃以下,保持温度不超过5℃,通入硫化氢气体,当溶液全部变黑时(约需25 min),离心,上清液经用酸处理过的滤纸浆过滤,滤液加入5mol/L的氢氧化钠液,调pH=3.8,再加入溶液总量的千分之五的5mol/L的氯化钠和三倍量体积的95%的乙醇,冰箱中放置过夜,收集沉淀,将沉淀中加入丙酮研磨脱水,直至全部成粉末状,丙酮洗涤2-3次,真空干燥即得三磷酸腺苷二钠。
上清液[硝酸,硝酸汞]→[1h]ATP汞盐[硫化氢气体]→[5℃,20-25min]ATP溶液[5mol/L氢氧化钠,氯化钠,乙醇]→[pH3.8]ATP钠盐[丙酮脱水]→[五氧化二磷减压干燥]ATP成品
树脂法提取 将上清液中加入3-4倍体积的95%乙醇,搅拌,冷却放置4-5 h,过滤,得粗品。将粗品溶解在少量蒸馏水中,加入1/2粗品质量的硅藻土,搅拌吸附杂质,过滤。滤液上732H+阳离子树脂柱,当流出液的pH值由6下降至1,又上升到2时,表明柱内水已流完,即开始收集。将流出液用6mol/L的氢氧化钠调pH=6.5-7后,上717C1-型阴离子交换树脂柱,用25%的乙酸钡检查流出液,有白色沉淀出现时,说明吸附ATP和ADP足量,即可洗脱。先用pH2.5、0.003mol/L盐酸溶液(含0.03mol/L氯化钠)洗脱,电泳检查流出液至ADP消失,260nm吸收值降至稳定,并略有回升时,说明有ATP出现,停止洗脱。洗脱下的ADP溶液调pH至7,用阴离子树脂柱浓缩回收。然后用 pH3.8、1mol/L氯化钠溶液洗脱,至流出液不再被乙醇沉淀为止,洗脱下的ATP溶液按1:1的量加硅藻土过滤除热原,调pH=3.8,加3-4倍体积的45%的乙醇,放置过夜。过滤,分别用无水乙醇和乙醚洗涤,脱水,真空干燥,即得ATP成品。
$S001$S
方法三、氧化磷酸化法
氧化 将AMP50g用2L水溶解,如有不溶用6mol/L的氢氧化钠调节至全溶。取磷酸氢二钾184.8g,磷酸二氢钾57.5g,硫酸镁17.5g,溶于5L自来水中。将两溶液混合,加入新鲜酵母2kg,葡萄糖175g,在30-32℃下缓慢搅拌,使其发酵,电泳法或测定无机磷方法观察转化情况,当部分AMP转化时,可提高温度至37℃,AMP斑点消失时为反应终点,约需4-6h。反应液冷却至15℃加入40%三氯乙酸500ml,并用盐酸调pH=2,过滤,得上清液。
5'-AMP[磷酸氢二钾,磷酸二氢钾,硫酸镁]→[水]混合液[啤酒酵母,葡萄糖]→[30-32℃,4-6h]反应液[氯乙酸]→[15℃,pH2]上清液
分离、去氨 上清液加活性炭,在pH2条件下缓慢搅拌2h,使活性炭吸附ATP,倾去清液,用pH2的水洗涤活性炭后,将活性炭装入层析柱中,用pH2的水洗至澄清,然后用体积比为氨水:水:95%的乙醇=4:6:100的混合液洗脱ATP。将洗脱液置于冰浴中,盐酸调至pH 3.8,加3-4倍体积的95%的乙醇,在5-10℃静置,过滤,得粗品。
上清液[活性炭]→[pH2, 2h]吸附物[氨水、水、乙醇]→[混合液]洗脱液[盐酸、乙醇]→[pH3.8, 5-10℃, 6-8h]ATP粗品
纯化 将粗品溶于1.5L蒸馏水中。加硅藻土50g,搅拌,过滤,滤液调pH 3,上717C1-型阴离子交换树脂柱,用pH 3的0.03mol/L的氯化钠溶液洗脱,除杂质,然后用pH 3.8,1mol/L的氯化钠溶液洗脱,当洗脱液遇乙醇溶液出现沉淀时开始收集,得ATP洗脱液。
$S001$S
精制 洗脱液加硅藻土25g搅拌15min,抽滤,滤液调pH=3.8,加3-4倍95%的乙醇,置冰箱中过夜,抽滤,丙酮和乙醚洗涤,真空干燥,即得ATP成品。
ATP洗脱液[蒸馏水,硅藻土]→[pH3.8]ATP沉淀[丙酮、乙醚脱水]→[五氧化二磷减压干燥]ATP成品
方法四、产氨短杆菌直接发酵法
菌种培养 培养基组成为葡萄糖10%,硫酸镁1%,尿素0.3%,氯化钙0.01%,玉米浆适量,磷酸氢二钾1%,磷酸二氢钾1%,pH 7.2。种龄为20-24h,接种量7%-9%,pH=6.8-7.2。
产氨酶杆菌B1-787[斜面培养]→[30℃, 2-3d]菌种斜面[种子培养]→[30℃,2-3d]菌种培养液
发酵培养 发酵罐培养温度30℃,36h,并投入腺嘌呤,加尿素,氢氧化钠,氨,控制pH值。500L发酵罐条件:投入腺嘌呤前温度28℃,24h前通风量1:0.5V/(V·min),24h后通风量1:1V/(V·mm),40h投入腺嘌呤0.2%, 6501(椰子油酰胺)0.15%,尿素0.3%,升温至37℃,pH=7,得发酵液。
菌种培养液[发酵]→[30℃, 36h]发酵液[腺嘌呤,6501,尿素]→[37℃,通风pH=7]发酵液
提取、精制 加热发酵液使酶失活,调节pH=3-3.5,过滤,将滤液经769活性炭柱吸附,用氨醇洗脱液洗脱,洗脱液经Cl-型阴离子交换树脂洗附后,用氯化钠-盐酸溶液洗脱,将冷的乙醇加入洗脱液中,使沉淀产生,过滤,用丙酮洗涤,真空干燥,即得ATP精品。
发酵液[热处理]→[pH3.5,过滤]上清液[769活性炭柱]→吸附物[氨醇溶液]→[Cl-型阴离子树脂]→吸附物[氯化钠-盐酸溶液]→洗脱液[冷乙醇]→ATP[丙酮、乙醚脱水]→[五氧化二磷减压干燥]ATP成品。
兔肉松的制备 将冰冻过的兔体迅速去骨后绞碎,加入3-4倍量的95%乙醇,搅拌30min后过滤,制成肉糜,再加入2-2.5倍的乙醇重复上述操作,将肉糜置于乙醇中,加热煮沸5min,取出并迅速置于冷却的乙醇中降温至10℃以下,过滤并压干,将肉饼捣碎后冷风吹干制得兔肉松。
兔肉[绞碎]→[冰浴]肉糜[95%冷乙醇]→[30min]变性肉糜[95%乙醇]→[煮沸5min]肉饼[捣碎,吹干]→[<10℃]肉松
提取、吸附、洗脱 将肉松加入4倍量的蒸馏水,搅拌30min,过滤压成肉饼,捣碎后再加3倍量的蒸馏水重复上述操作,将两次的滤液合并,加入总体积4%的冰醋酸,用6mol/L盐酸调pH为3,冰浴冷却后过滤,滤液经阴离子交换树脂吸附,用pH3、0.03 mol/L氯化钠溶液洗涤柱上滞流的AMP、ADP及无机盐等至薄层层析检查无AMP、ADP斑点而有ATP斑点出现时,再用pH 3.8、1mol/L氯化钠液洗脱ATP,收集洗脱液,为防止ATP的水解,上述过程应在0-10℃进行。
$S001$S
除热原及杂质、结晶、干燥 洗脱液用0.6%的硅藻土和0.4%的活性炭除去热原及杂质,然后用6mol/L盐酸调pH为2.5-3,在28℃恒温水浴中加 3-4倍量的95%乙醇,使ATP-二钠盐结晶,收集结晶,干燥,得ATP成品。
ATP洗脱液[硅薄土,活性炭]→[10min]滤液[乙醇]→[pH2.5-3, 28℃]ATP成品
方法二、光合磷酸化法
叶绿体混悬液的制备 新鲜菠菜叶7kg,用水洗净后加入Tris缓冲液10L,搅碎后离心,即得。
新鲜菠菜叶[Tris缓冲液]→[捣碎3min,离心]叶绿体混悬液
肌激酶的制备 将乙二胺四乙酸钠27.9g和氢氧化钠63g加冷蒸馏水溶解后,稀释,至37.5L。取家兔肌肉,浸入冰块中,搅碎成肉浆,加入等体积的乙二胺四乙酸钠-氢氧化钠溶液,搅拌提取10min,离心,取上清液,加入总体积的0.05倍的2mol/L盐酸,水浴加热至90℃,保温3min后,置冰浴中降温至20℃,加2mol/L氢氧化钠调pH至6.5,离心,取上清液装瓶密封,冰箱冷冻保存。
兔肉[乙二胺四乙酸钠,氢氧化钠]→[10min]肌激酶
光合反应 将磷酸氢二钠150g用2L蒸馏水溶解后,再加入Tris50g、 AMP55g,搅拌使其溶解,加水稀释至4L,加6mol/L盐酸调pH至7.8-7.9。将该溶液与含ATP55g的0.308%二氮蒽甲硫酸盐溶液50ml及肌激酶250ml的混合溶液混合,加入叶绿体混悬液中,保持pH7.9-8,开始进行光照,光照时保持温度为18℃左右,至反应终点(约1.5h)时停止照光,稍冷却,搅拌下加入40%三氯乙酸凝固蛋白,过滤,上清液作进一步处理。
5'-AM[磷酸氢二钠,Tris, 二氮蒽甲硫酸]→[10min]混合液[碘钨灯,光照]→[pH8, 18℃]反应液[40%三氯乙酸]→[<10℃]上清液
三磷酸腺苷二钠的提取
汞盐法提取 上清液搅拌下加入硝酸汞溶液500ml(重量比为硝酸汞:硝酸:蒸馏水=2.5:0.9:2的混合溶液)静置1h,过滤,滤饼用冷蒸馏水洗涤后加1.1L蒸馏水,成细浆状混悬液,冰浴冷却,使温度降至3℃以下,保持温度不超过5℃,通入硫化氢气体,当溶液全部变黑时(约需25 min),离心,上清液经用酸处理过的滤纸浆过滤,滤液加入5mol/L的氢氧化钠液,调pH=3.8,再加入溶液总量的千分之五的5mol/L的氯化钠和三倍量体积的95%的乙醇,冰箱中放置过夜,收集沉淀,将沉淀中加入丙酮研磨脱水,直至全部成粉末状,丙酮洗涤2-3次,真空干燥即得三磷酸腺苷二钠。
上清液[硝酸,硝酸汞]→[1h]ATP汞盐[硫化氢气体]→[5℃,20-25min]ATP溶液[5mol/L氢氧化钠,氯化钠,乙醇]→[pH3.8]ATP钠盐[丙酮脱水]→[五氧化二磷减压干燥]ATP成品
树脂法提取 将上清液中加入3-4倍体积的95%乙醇,搅拌,冷却放置4-5 h,过滤,得粗品。将粗品溶解在少量蒸馏水中,加入1/2粗品质量的硅藻土,搅拌吸附杂质,过滤。滤液上732H+阳离子树脂柱,当流出液的pH值由6下降至1,又上升到2时,表明柱内水已流完,即开始收集。将流出液用6mol/L的氢氧化钠调pH=6.5-7后,上717C1-型阴离子交换树脂柱,用25%的乙酸钡检查流出液,有白色沉淀出现时,说明吸附ATP和ADP足量,即可洗脱。先用pH2.5、0.003mol/L盐酸溶液(含0.03mol/L氯化钠)洗脱,电泳检查流出液至ADP消失,260nm吸收值降至稳定,并略有回升时,说明有ATP出现,停止洗脱。洗脱下的ADP溶液调pH至7,用阴离子树脂柱浓缩回收。然后用 pH3.8、1mol/L氯化钠溶液洗脱,至流出液不再被乙醇沉淀为止,洗脱下的ATP溶液按1:1的量加硅藻土过滤除热原,调pH=3.8,加3-4倍体积的45%的乙醇,放置过夜。过滤,分别用无水乙醇和乙醚洗涤,脱水,真空干燥,即得ATP成品。
$S001$S
方法三、氧化磷酸化法
氧化 将AMP50g用2L水溶解,如有不溶用6mol/L的氢氧化钠调节至全溶。取磷酸氢二钾184.8g,磷酸二氢钾57.5g,硫酸镁17.5g,溶于5L自来水中。将两溶液混合,加入新鲜酵母2kg,葡萄糖175g,在30-32℃下缓慢搅拌,使其发酵,电泳法或测定无机磷方法观察转化情况,当部分AMP转化时,可提高温度至37℃,AMP斑点消失时为反应终点,约需4-6h。反应液冷却至15℃加入40%三氯乙酸500ml,并用盐酸调pH=2,过滤,得上清液。
5'-AMP[磷酸氢二钾,磷酸二氢钾,硫酸镁]→[水]混合液[啤酒酵母,葡萄糖]→[30-32℃,4-6h]反应液[氯乙酸]→[15℃,pH2]上清液
分离、去氨 上清液加活性炭,在pH2条件下缓慢搅拌2h,使活性炭吸附ATP,倾去清液,用pH2的水洗涤活性炭后,将活性炭装入层析柱中,用pH2的水洗至澄清,然后用体积比为氨水:水:95%的乙醇=4:6:100的混合液洗脱ATP。将洗脱液置于冰浴中,盐酸调至pH 3.8,加3-4倍体积的95%的乙醇,在5-10℃静置,过滤,得粗品。
上清液[活性炭]→[pH2, 2h]吸附物[氨水、水、乙醇]→[混合液]洗脱液[盐酸、乙醇]→[pH3.8, 5-10℃, 6-8h]ATP粗品
纯化 将粗品溶于1.5L蒸馏水中。加硅藻土50g,搅拌,过滤,滤液调pH 3,上717C1-型阴离子交换树脂柱,用pH 3的0.03mol/L的氯化钠溶液洗脱,除杂质,然后用pH 3.8,1mol/L的氯化钠溶液洗脱,当洗脱液遇乙醇溶液出现沉淀时开始收集,得ATP洗脱液。
$S001$S
精制 洗脱液加硅藻土25g搅拌15min,抽滤,滤液调pH=3.8,加3-4倍95%的乙醇,置冰箱中过夜,抽滤,丙酮和乙醚洗涤,真空干燥,即得ATP成品。
ATP洗脱液[蒸馏水,硅藻土]→[pH3.8]ATP沉淀[丙酮、乙醚脱水]→[五氧化二磷减压干燥]ATP成品
方法四、产氨短杆菌直接发酵法
菌种培养 培养基组成为葡萄糖10%,硫酸镁1%,尿素0.3%,氯化钙0.01%,玉米浆适量,磷酸氢二钾1%,磷酸二氢钾1%,pH 7.2。种龄为20-24h,接种量7%-9%,pH=6.8-7.2。
产氨酶杆菌B1-787[斜面培养]→[30℃, 2-3d]菌种斜面[种子培养]→[30℃,2-3d]菌种培养液
发酵培养 发酵罐培养温度30℃,36h,并投入腺嘌呤,加尿素,氢氧化钠,氨,控制pH值。500L发酵罐条件:投入腺嘌呤前温度28℃,24h前通风量1:0.5V/(V·min),24h后通风量1:1V/(V·mm),40h投入腺嘌呤0.2%, 6501(椰子油酰胺)0.15%,尿素0.3%,升温至37℃,pH=7,得发酵液。
菌种培养液[发酵]→[30℃, 36h]发酵液[腺嘌呤,6501,尿素]→[37℃,通风pH=7]发酵液
提取、精制 加热发酵液使酶失活,调节pH=3-3.5,过滤,将滤液经769活性炭柱吸附,用氨醇洗脱液洗脱,洗脱液经Cl-型阴离子交换树脂洗附后,用氯化钠-盐酸溶液洗脱,将冷的乙醇加入洗脱液中,使沉淀产生,过滤,用丙酮洗涤,真空干燥,即得ATP精品。
发酵液[热处理]→[pH3.5,过滤]上清液[769活性炭柱]→吸附物[氨醇溶液]→[Cl-型阴离子树脂]→吸附物[氯化钠-盐酸溶液]→洗脱液[冷乙醇]→ATP[丙酮、乙醚脱水]→[五氧化二磷减压干燥]ATP成品。
腺苷5'-三磷酸二钠三水合物价格(试剂级)
- 更新日期 2024-11-08
- 产品编号 65001831
- 品牌
- 产品信息 腺苷-5‘-三磷酸二钠盐,二水 Adenosine-5‘-triphosphate disodium salt dihydrate
- CAS号
- MDL号
- 规格与纯度
- 包装 1g
- 价格 182
- 库存信息 >10
- 更新日期 2024-04-30
- 产品编号 BP413-25
- 品牌
- 产品信息 腺苷5'-三磷酸二钠 ATP DISODIUM 25G
- CAS号 51963-61-2
- MDL号
- 规格与纯度
- 包装 25g
- 价格 1655
- 库存信息 0
- 更新日期 2020-09-30
- 产品编号 BP413-25
- 品牌
- 产品信息 三磷酸腺苷二钠 ATP DISODIUM 25G
- CAS号 51963-61-2
- MDL号
- 规格与纯度 Null
- 包装 25g
- 价格 1224
- 库存信息 0