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T7pLysY感受态细胞的应用
大肠杆菌经Ca离子处理后可摄取外源DNA(Plasmid、Phage DNA),处于这种状态的细胞称作感受态细胞(Competent Cells)。T7pLysY菌株为大肠杆菌BL21增强型菌株,为Lon和OmpT蛋白酶缺陷型,用于毒性或非毒性蛋白的表达。该菌株区别于BL21(DE3)pLysS和BL21(DE3)pLysE菌株的优势在于T7 RNA聚合酶基因整合在细菌染色体上的lac操纵子区域,基因组中无λ前噬菌体序列,LysY表达的T7溶菌酶保留了对T7 RNA聚合酶的抑制作用但缺失了水解细胞壁的酰胺酶活性,有利于降低基因的背景表达和避免诱导过程中细菌的裂解,菌株具有抗T1噬菌体感染等特点。T7pLysY表达感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率大于108cfu/μg DNA。
2020-02-13
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