去氟阿托伐他汀钙的制备

概述^[1]

阿托伐他汀钙属于羟甲基戊二酰辅酶(HMG-CoA)还原酶抑制剂，它主要通过抑制肝脏内HMG-CoA还原酶来降低血浆中胆固醇和血清脂蛋白的浓度。主要适应症有原发性高胆固醇血症、混合性高血脂症以及家族性高胆固醇血症。阿托伐他汀钙作为全球畅销的降血脂药物，必须严格控制杂质的含量，去氟阿托伐他汀钙为其主要杂质，为确保用药安全，其制备过程中产生的杂质、去氟阿托伐他汀钙等均可引起不良反应。全合成得到去氟阿托伐他汀钙,为阿托伐他汀产品质量分析及控制提供重要依据。

制备^[2]

方法1：

异丁酰乙酰苯胺(4)的合成　将6.32g(0.04mol)异丁酰乙酸乙酯(3),100mL无水二甲苯加入250mL三口瓶接常压蒸馏装置中,氮气保护下,升温至145～150℃,滴加4.8mL(0.053mol)苯胺,反应约5min开始蒸出乙醇共沸物,TLC(石油醚∶乙酸乙酯=4∶1)检测反应完全后,撤出油浴,将反应液倾倒入25mL烧杯中冷却,加入1mol·L-1稀盐酸10mL,搅拌30min,放置过夜,过滤,依次用水、乙醚洗涤,常温干燥得类白色固体(4)4.5g,产率55%。

4-甲基-3-氧代-N-苯基-2-(苯亚甲基)戊酰胺(5)的合成　取2.05g(0.01mol)化合物4,16mL正己烷,35mL吗啉,0.12mL乙酸加入装有分水器、回流冷凝管的三口瓶中,氮气保护下加入1.12mL(0.011mol)苯甲醛,加热回流约5h,TLC(石油醚∶乙酸乙酯=5∶1)检测反应完全后,冷却,过滤,再加入15mL正己烷和10mL饱和亚硫酸钠溶液,加热至50～60℃调成泥浆状,再冷却至20～25℃,过滤,水洗,干燥得到类白色固体(5)1.03g,产率35%。

4-甲基-3-氧代-2-(2-氧代-1,2-二苯乙基)-N-苯戊酰胺(6)的合成　在装有氮气保护、回流装置的25mL三口瓶中,加入0.6g(2.4mmol)3-乙基-5-(2-羟乙基)-4-甲基噻唑溴化物,3.3g(11mmol)化合物5,1.12g(12mmol)三乙胺,1.4g(13mmol)苯甲醛,10mL无水乙醇,搅拌加热至80℃,反应约24h,TLC(石油醚∶乙酸乙酯=5∶1)检测反应完全后,浓缩得粘稠状浅褐色物质,柱层析(硅胶80～120目,石油醚∶乙酸乙酯=6∶1),收集组分,浓缩后再结晶得产物(6)1.4g,产率32%。

脱氟阿托伐他汀叔丁酯(7)的合成　在装有回流装置的25mL圆底烧瓶中,加入1g(2.5mmol)化合物6,0.8g(2.9mmol)化合物2,20mL环己烷,1mLTHF,0.4g(3.9mmol)新戊酸,回流反应24h,TLC(石油醚∶乙酸乙酯=4∶1)检测反应完全后,浓缩得黄色油状物2.2g,柱层析(石油醚∶乙酸乙酯=5∶1)得1.02g纯品(7),产率64%,mp:128～130℃。

去氟阿托伐他汀钙(1)的合成　上述0.5g(0.72mmol)纯品7溶解于20mLTHF中,控温于20～25℃,逐滴加入1.6mL10%HCl,搅拌5.2h,加入1.1mL40%NaOH溶液,搅拌17h,HPLC检测反应完全后,将反应液倾入水/正己烷(10mL/10mL)中,分出水层,加入正己烷/THF(20mL/5mL),水层用乙酸乙酯萃取,乙酸乙酯层加入5%Ca(OAc)2溶液6mL,搅拌1h,滤出固体,水洗,干燥得0.315g去氟阿托伐他汀钙产品(1),收率36%。HPLC测定色谱纯度达98%。

方法二：

（a）（4R-cis)-6-[2-[2-(4-氟苯基)-5-(1-异丙基)-3-苯基-4-[(苯胺)羟基]-1H-吡咯-1-基]乙基]-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-乙酸叔丁酯的制备

向10L干燥洁净的反应釜中投入1kg(4R-cis)6-氨乙基-2,2-二甲基-1,3-二氧六环-4-乙酸叔丁酯，6L甲苯，0.41kg特戊酸，在室温下搅拌1小时;向反应釜中加入1.1kg2-[2-(4-氟苯基)-2-氧代-1-苯基乙基]-4-甲基-3-氧代-N-苯基戊酰胺，升温回流（105℃-110℃）至反应结束（TLC检测跟踪，展开剂为乙酸乙酯：石油醚=1:2）。停止加热，冷却降温至25℃-30℃，加入5L的饱和碳酸氢钠溶液洗涤一次，有机相再用2*5L纯化水洗涤2次，然后将有机相转入旋转蒸发仪中，在60℃下减压浓缩至干，得到4R-cis)-6-[2-[2-(4-氟苯基)-5-(1-异丙基)-3-苯基-4-[(苯胺)羟基]-1H-吡咯-1-基]乙基]-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-乙酸叔丁酯粗品。

将粗品与4L异丙醇混合加热至回流，料液溶清后，自然冷却至室温，保温半小时，然后降温至0℃-5℃，保温搅拌1小时，抽滤，用1L石油醚淋洗滤饼，烘干，得到4R-cis)-6-[2-[2-(4-氟苯基)-5-(1-异丙基)-3-苯基-4-[(苯胺)羟基]-1H-吡咯-1-基]乙基]-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-乙酸叔丁酯精品1.5kg，收率为94%，纯度为99.5%。

（b）(4R-cis)-6-[2-[2-(4-氟苯基)-5-(1-异丙基)-3-苯基-4-[(苯胺)羟基]-1H-吡咯-1-基]乙基]-1,3-二羟基-4-乙酸叔丁酯的制备

将步骤（a）所得精品用4.5L甲醇溶解后转入20L干燥洁净的反应釜中，加入4.5L水后，冷却降温至0℃-5℃，缓慢滴加6L10wt%的稀盐酸，控制整个滴加过程反应液温度不超过25℃。滴加结束后，关闭冷却，升温到25℃-30℃，保温搅拌2小时-3小时至反应完全（TLC检测跟踪，展开剂为乙酸乙酯：石油醚=1:2）反应液用2*9L甲苯萃取2次，弃水相，合并有机相，装入旋转蒸发仪，在60℃下减压浓缩至干，得到(4R-cis)-6-[2-[2-(4-氟苯基)-5-(1-异丙基)-3-苯基-4-[(苯胺)羟基]-1H-吡咯-1-基]乙基]-1,3-二羟基-4-乙酸叔丁酯1.35kg,收率为96%，纯度98.9%。

（c）[R,(R*,R*)]-2-(4-氟苯基)-β,α-二羟基-5-(1-甲基乙基)-3-苯基-[(苯胺基)-羟基]-1H-吡咯-1-庚酸钠盐溶液的制备。

将步骤（b）所得产品用6L甲醇溶解后投入到20L干燥洁净的反应釜中，冷却降温至0℃-5℃，缓慢滴加1L10wt%的氢氧化钠溶液，控制整个滴加过程反应液温度不超过15℃。滴加结束后，关闭冷却，升温到25℃-30℃，保温搅拌2.5小时-3小时至反应完全（TLC检测跟踪，展开剂为乙酸乙酯：石油醚=1:1）。向反应液中加入6L纯化水和6L甲苯，搅拌20分钟，静置分层，收集水相。水相再用6L甲苯洗涤一次，所得水相即为[R,(R*,R*)]-2-(4-氟苯基)-β,α-二羟基-5-(1-甲基乙基)-3-苯基-[(苯胺基)-羟基]-1H-吡咯-1-庚酸钠盐溶液。

（d）阿托伐他汀钙粗品的制备

将步骤（c）中所得钠盐溶液转入10L洁净干燥的反应釜中，再向釜中加入3L甲醇，升温至60℃-65℃，通过恒压滴液漏斗缓慢滴加乙酸钙溶液（乙酸钙溶液为150g一水合乙酸钙与700ml纯化水和700ml甲醇混合配制而得）。滴加结束后，在60℃-65℃下保温搅拌2小时。停止加热，冷却至5℃-10℃，保温搅拌1小时。抽滤，得白色滤饼，即为阿托伐他汀钙粗品。

阿托伐他汀钙中去氟阿托伐他汀钙的分离

仪器设备：AgelaTechnologiesCHEETAHHP-100

色谱柱：球形硅胶，15μm，200mm×60mmID

流动相：四氢呋喃:水＝1:30(体积比)

负载比：100

柱压：0.1MPa

检测波长：254nm

进样量：1g/injection

将阿托伐他汀钙缩合物用流动相溶解后，负载在色谱柱上，然后用流动相洗脱分离，分段收集洗脱液，将含有去氟阿托伐他汀钙的洗脱液减压浓缩至干，浓缩液加入乙酸乙酯溶解，用饱和柠檬酸洗涤，有机相减压浓缩至干得到白色泡沫状固体，纯度为99.6％，经过质朴检测MS(ESI):[M+H]+:855，即为去氟阿托伐他汀钙。

主要参考资料

[1] 刘怀昌, 严俊儒, & 徐宁. (2005). 阿托伐他汀与氟伐他汀对老年高脂血症强化降脂治疗的疗效和安全性观察. 中国现代医学杂志, 15(14), 2205-2207.

[2] 薛雨, 罗刚, 王瑛瑛, 窦瑶, 徐寅正, & 陈宇瑛. (2011). 脱氟阿托伐他汀钙的全合成. 中国新药杂志(15), 1459-1462.

[3] 张可英[1], & 李秀昌[2]. (2016). 阿托伐他汀与氟伐他汀对冠心病患者心率变异性的影响. 山东医药, 56(33), 44-46.