甘草素二糖苷的制备方法

背景及概述^[1]

胀果甘草(GlycyrrhiziainflataBat.)产于我国西北部，其根及根茎为常用传统中药已被列入我国药典作为法定品种应用。我们对其根茎的95%乙醇提取部分进行化学成分及其抗氧化活性的研究，从中分得二十多个化合物。体外药理实验表明，光甘草酮和胀果香豆素甲[5]有较好的抗氧化活性。本文报道其中两个二氢黄酮甙的分离和结构鉴定。95%乙醇提取物经硅胶柱层析粗分，极性较大部分经大孔吸附树脂柱处理，水-乙醇梯度洗脱，86%乙醇部分用SephadexLH-20柱精制，最后用HPLC法分得两个结构近似的二氢黄酮甙。

甘草素二糖苷为白色粉末，mp214～215℃，Molish反应紫红色，NaBH4反应红色，在甲醇中吸收为275.0nm，310.2nm处有肩峰，提示为二氢黄酮甙。FAB-MS给出准分子离子峰m/z551(M+H)+，573(M+Na)+和589(M+K)+。甘草素二糖苷酸水解得到一白色针状结晶，mp207～208℃，EIMS给出其分子离子峰m/z256，其红外和薄层与甘草素标准品完全一致，示其甙元为甘草素。甘草素二糖苷的氢谱有δ5.39(1H，d，J=2.4Hz)和4.99(1H，d，J=7.2Hz)质子信号，碳谱有δ108.6ppm和98.6ppm碳信号，HETCOR谱有上述碳氢的对应相关峰。甘草素二糖苷的酸水解产物经双向薄层与标准糖对照，示有葡萄糖和芹糖，甘草素二糖苷的FAB-MS有碎片峰m/z257(aglycone+H)+，419(aglycone+glc+H)+，389(aglycone+api+H)+，芹糖有几种异构体，甘草素二糖苷在硼酸络合薄层不展开(常规薄层Rf=0.35)，J1，2(2.4Hz)值较小，芹糖中2，3位羟基处于同侧，其碳信号与文献值比较，二者也基本一致，证实上述推论.甘草素二糖苷的NOE差谱示δ6.38(1H，d，J=1.8Hz，8-H)与δ5.39(1H，d，J=2.4Hz，api1-H)，δ7.07(2H，d，J=8.4Hz，3′，5′-H)与δ4.99(1H，d，J=7.2Hz，glc1-H)间有相互的NOE效应，甘草素二糖苷芹糖连接在甘草素7位羟基上，葡萄糖连接在4′位羟基上；I的HMBC谱上有δ108.6ppm(apiC-1)处碳与δ6.38(1H，d，J=1.8Hz)处质子的相关峰和δ157.2ppm(C-4′)处碳与δ4.99(1H，d，J=7.2Hz)处质子的相关峰，证实上述推论正确。

制备^[1]

胀果甘草13.5kg用95%EtOH提取，回收EtOH，浓缩后拌硅胶，依次用石油醚，EtOAc和EtOH洗脱。取95%EtOH洗脱物25g，经大孔吸附树脂D101，H2O—EtOH梯度洗脱，86%EtOH洗脱部分经SephadexLH-20柱，MeOH洗脱，16～17流份经HPLC分离，流动相CH3CN—3%HOAc(58∶42)，得甘草素二糖苷(240mg)。

主要参考资料

[1] 胀果甘草中2个新的二氢黄酮甙