轴突生长因子CD108抗体的应用

背景^[1-6]

轴突生长因子CD108抗体是用轴突生长因子CD108等作为抗原刺激兔机体，产生免疫学反应，由兔机体的浆细胞合成并分泌的与抗原有特异性结合能力的一组免疫球蛋白，这种与抗原有特异性结合能力的免疫球蛋白就是轴突生长因子CD108抗体。

轴突生长因子CD108蛋白可以通过与α1β1结合刺激巨噬细胞和单核细胞产生诸如IL-8,IL-6,IL-1β以及TNF-α等炎症因子。近期另有多篇研究发现,轴突生长因子CD108在肝纤维化,神经损伤,肺纤维化,皮肤炎症,角膜炎症和多种硬化症中均有发挥促炎作用。尽管目前我们得知轴突生长因子CD108参与多种生理性过程及病理性疾病中,但轴突生长因子CD108是否参与动脉粥样硬化疾病的发生尚无报道。

应用^[7][8]

用于小鼠动脉粥样硬化发生发展机制的研究

动脉粥样硬化是引发心血管疾病的主要原因。近年来,动脉粥样硬化被认为是一种系统性免疫炎症的疾病,先天性免疫与获得性免疫均参与其。损伤早期形态学变化即脂质条纹,是一种严重的代谢和免疫损伤,表现为血管张力异常,炎症,细胞和内皮功能障碍。随后损伤形成斑块继续生长,最终凸入管腔或发生破裂。当脂质斑块破裂后,形成的动脉血栓会导致急性冠脉综合征(ACS)、心肌梗死或脑中风等恶性临床事件,对人类的健康危害极大。但其发病机制目前仍不是十分清楚,寻找有效药物对该疾病的治疗迫在眉睫。

1.利用Apo E-/-小鼠喂食高脂饲料1周,4周,12周,通过RNA以及蛋白水平检测轴突生长因子CD108及受体在动脉粥样硬化发展过程中的表达情况。

2.制备轴突生长因子CD108-/-Apo E-/-双敲除小鼠。

3.通过对载脂蛋白E(Apo E)敲除小鼠(以下简写为Apo E-/-小鼠)喂食高脂饲料(high-fat diet,以下简写为HFD),建立动脉粥样硬化小鼠模型。

4.轴突生长因子CD108-/-Apo E-/-双敲除小鼠与轴突生长因子CD108+/+Apo E-/-单敲除小鼠,,在喂食高脂饲料12周前后的体重对比,检测轴突生长因子CD108存在与否对动脉粥样硬化小鼠的体重产生影响。

并通过眼眶后静脉丛抽取高脂血症小鼠的静脉血,分离血清,检测比较轴突生长因子CD108-/-Apo E-/-双敲除小鼠与轴突生长因子CD108+/+Apo E-/-单敲除小鼠血浆中的血脂含量,分析轴突生长因子CD108对高脂血症状态下小鼠血脂含量的影响。

5.当喂食HFD 12周后,Apo E-/-小鼠能够形成稳定的动脉粥样硬化斑块,钝性分离得到小鼠整只主动脉,通过苏丹红染色,对比轴突生长因子CD108-/-Apo E-/-双敲除小鼠与轴突生长因子CD108+/+Apo E-/-单敲除小鼠斑块的分布与大小,研究轴突生长因子CD108是否影响Apo E-/-小鼠冠状及胸主动脉中脂质斑块的形成。并通过对比两组小鼠斑块内细胞种类以及分布的不同,研究轴突生长因子CD108存在与对斑块内细胞成分的影响。

6.取形成稳定斑块的小鼠的主动脉组织,通过提取组织RNA,逆转录并通过定量PCR方法检测巨噬细胞活化亚型的相应细胞因子表达,进而分析巨噬细胞的极化情况。

7.动脉粥样硬化模型构建成功后,分离全血血清,比较轴突生长因子CD108-/-Apo E-/-双敲除小鼠与轴突生长因子CD108+/+Apo E-/-单敲除小鼠血浆中T细胞活化分泌的细胞因子的水平以及炎症因子的水平,检测轴突生长因子CD108对高脂血症状态下小鼠炎症因子含量的影响。

参考文献

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