鹅肌肽的应用及制备

背景及概述^[1]

鹅肌肽亦称“N-(β-氨基丙酰)-1′-甲基组氨酸”，其干燥物有强吸湿性。溶于水，微溶于甲醇、乙醇。pK₁＝2.64、pK₂＝7.04、pK₃＝9.49。与20%H₂SO₄一起加热水解为β-丙氨酸和1′-甲基组氨酸。为鸟肌肉组织成分，首先由鹅肌肉中发现，故名。制法：由鸟肌肉中分离，或由1′-甲基-L-组氨酸甲酯与N-苯甲氧酰-β-丙氨酸叠氮化物作用后经水解和催化氢化合成。用途：作生化研究。

应用^[2-4]

鹅肌肽是天然存在于脊椎动物体内的一类组氨酸二肽，具有显著的降尿酸、抗氧化、抗衰老等功能，在食品工业中有广泛的应用。其应用举例如下：

1）制备一种含鹅肌肽的鱼多肽干粉、降尿酸肽组合物、饮料，该含鹅肌肽的鱼多肽干粉的制备方法，包括以下步骤：将金枪鱼肉绞碎，漂洗，经漂洗液漂洗，喷雾干燥，得到鱼多肽干粉。上述含鹅肌肽的鱼多肽干粉的制备方法，以金枪鱼为原料制备，工艺简单，成本较低，效果稳定。其制得的降尿酸肽组合物，各组分相互配合、配伍合理，制备得到一种安全、高效、无任何副作用的具有显著降尿酸作用的降尿酸肽组合物料。

2）制备一种治疗痛风的组合物，其活性成分包括酸樱桃提取物、肉桂提取物、人参提取物、党参提取物、菟丝子提取物、肉苁蓉提取物、干姜提取物、葵花盘提取物、鼠曲草提取物，西芹籽提取物，车前子提取物、木瓜提取物、桑枝提取物、杜仲提取物、鹅肌肽。本发明的组合物适用于痛风患者，有降低尿酸、缓解痛风症状的功效；制成膳食轻饮后，口感怡人，易于被患者所接受。

3）制备一种祛痘组合物，属于化妆品领域。该祛痘组合物包括：一定重量份的鹅肌肽和一定重量份的麦门冬提取物。这种祛痘组合物对痤疮丙酸杆菌具有极强的抑制作用，说明其具有很好的祛痘效果，且对肌肤无刺激，长期使用不会产生副作用，其可以作为祛痘活性组分，应用于多种化妆品中。

制备^[1]

步骤a、叔丁基(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)胺基)-3-甲氧基-3-氧丙基)-1H-咪唑基-1-碳酸酯的制备

L-组氨酸甲酯二盐酸盐(10g，41mmol)溶于100mL二氯甲烷中，20-30℃下分批加入碳酸氢钠(15.5g，184.5mmol)，加毕后，20-30℃搅拌1小时；冷却至0-10℃，分批加入二碳酸二叔丁酯(26.8g，123mmol)，缓慢升至20-30℃，搅拌24小时后，TLC检测反应完毕，过滤，水洗后用甲醇打浆，过滤后烘干得白色固体12.1g，摩尔收率80％。

步骤b和步骤c、N(τ)-甲基-L-组氨酸甲酯二盐酸盐的制备

叔丁基(S)-4-(2-((叔丁氧羰基)胺基)-3-甲氧基-3-氧丙基)-1H-咪唑基-1-碳酸酯(10g，27mmol)溶于100mL乙腈中，20-30℃加入碘甲烷(5.75g，40.5mmol)，升温至80-90℃回流，搅拌24h，TLC检测基本反应完全，浓缩后得到的粗品直接投下一步。粗品悬浮于四氢呋喃中，加入5mL6M的盐酸，20-30℃搅拌2小时；浓缩后用乙醇打浆，过滤后烘干得白色固体5.2g，摩尔收率75％，纯度97％。1HNMR(400MHz，D2O)：δ＝8.75(s，1H)，7.48(s，1H)，4.55(t，J＝7.3Hz，1H)，3.89(s，3H)，3.86(s，3H)，3.55(dd，J＝16.3，6.9Hz，1H)，3.42(dd，J＝16.1，7.3Hz，1H)。

步骤d、甲基N(α)-(3-((叔丁氧羰基)胺基)丙氧基)-N(τ)-甲基-L-组氨酸酯的制备

Boc-甘氨酸(10g，52.8mmol)溶于120mL二氯甲烷中。0-10℃加入三乙胺(18.7g，184.8mmol)、氯甲酸异丙酯(7.57g，55.4mmol)，缓慢升至20-30℃后继续搅拌两小时；20-30℃分批加入N(-甲基-L-组氨酸甲酯二盐酸盐(13.5g，52.8mmol)，维持该温度搅拌24小时，TLC检测反应基本完全，过滤后滤液用水洗，浓缩后用乙醇打浆，过滤后烘干的类白色固体15.0g，摩尔收率80％。1HNMR(CDCl3)：1.43(s，9H)，2.37(t，J＝5.8Hz，2H)，3.04(dd，J＝6.7，15.4Hz，1H)，3.10(dd，J＝6.7，15.4Hz，1H)，3.31(m，2H)，3.57(s，3H)，3.71(s，3H)，4.76(m，1H)，6.77(s，1H)，7.50(s，1H)。

步骤e、L-鹅肌肽的制备

甲基N(α)-(3-((叔丁氧羰基)胺基)丙氧基)-N()-甲基-L-组氨酸酯(10g，28mmol)溶于100mL甲醇中，加入1M的氢氧化钠水溶液28mL，20-30℃搅拌过夜；浓缩后加入100mL水，用盐酸调至pH2-4，20-30℃搅拌1小时，TLC检测反应完毕，分批加入碳酸氢钠固体中和至pH～8，浓缩。用四氢呋喃萃取，饱和食盐水洗涤，浓缩，加入甲叔醚析出固体，过滤后烘干，得白色固体6.0g，摩尔收率为90％，化学纯度为98％，光学纯度为98％。1HNMR(CD3OH)：d＝2.33(m，2H)，2.82(t，J＝6.6Hz，2H)，2.92(dd，J＝8.8，15.4Hz，1H)，3.20(dd，J＝8.8，15.4Hz，1H)，3.66(s，3H)，4.51(brdd，J＝4.5，8.8Hz，1H)，6.74(s，1H)，7.47(s，1H)。

主要参考资料

[1] 化合物词典

[2] CN201810215529.3含鹅肌肽的鱼多肽干粉、降尿酸肽组合物、饮料及制备方法

[3] CN201810560318.3一种治疗痛风的组合物及其制备方法

[4] CN201910058694.7祛痘组合物及其在祛痘化妆品中的应用

[5] CN201810768737.6一种N(τ)-甲基-L-组氨酸衍生物的制备方法及其在合成鹅肌肽中的应用