TLR8抗体的应用

背景^[1-3]

TLR8抗体是针对Toll样受体8（Toll-Like Receptor 8，TLR8）的一种特异性抗体，TLR8是一种在免疫应答中起着关键作用的免疫受体。

TLR8抗体

一、TLR8概述

TLR8是Toll样受体家族中的一员，主要分布在内膜分室和免疫细胞表面，如巨噬细胞、树突状细胞和B细胞等。它能够识别单链RNA分子，特别是富含病毒RNA，从而启动抗病毒免疫应答。TLR8介导的信号通路在免疫防御、炎症、自身免疫等多种生理和病理过程中发挥着关键作用。

二、TLR8抗体的特性

来源：TLR8抗体通常由兔、小鼠等实验动物制备，属于多克隆抗体或单克隆抗体。

特异性：TLR8抗体能够特异性地识别并结合TLR8蛋白，从而用于检测TLR8的表达、定位和功能研究。

应用范围：TLR8抗体适用于多种实验技术，如Western Blotting（WB）、ELISA、免疫组织化学（IHC）、免疫荧光（IF）等，可用于研究TLR8在不同组织和细胞类型中的表达水平、分布和调控机制。

三、TLR8抗体的应用

研究TLR8的表达和分布：通过免疫组织化学和免疫荧光技术，TLR8抗体可用于检测TLR8在不同组织和细胞类型中的表达水平和分布特点，有助于了解TLR8在免疫系统中的作用。

评估TLR8的功能：TLR8抗体可用于研究TLR8介导的信号通路、抗病毒免疫应答和免疫细胞的激活等过程，有助于深入了解TLR8在免疫应答和疾病发生中的重要作用。

药物研发：TLR8在抗病毒免疫中的作用已引起广泛关注，TLR8抗体的使用有助于筛选和验证针对TLR8的潜在药物，为抗病毒策略和疾病治疗的发展提供新的途径。

四、TLR8抗体的购买与选择

在购买TLR8抗体时，需要注意以下几个方面：

供应商选择：选择信誉良好、产品质量可靠的供应商，如Abcam、Sigma-Aldrich、Thermo Fisher Scientific等。

产品规格：根据实验需求选择合适的抗体规格，避免浪费。

价格与货期：不同供应商的价格和货期可能有所不同，需要进行比较和选择。

技术支持：选择提供完善技术支持和售后服务的供应商，以便在使用过程中遇到问题时能够及时得到解决。

五、注意事项

保存条件：TLR8抗体通常需要在-20℃或-80℃下保存，避免反复冻融，以确保其稳定性和活性。

使用前检查：在使用TLR8抗体前，请仔细检查其包装是否完好、有效期是否过期等信息。

实验操作：请按照产品说明书中的步骤进行实验操作，确保实验结果的准确性和可靠性。

应用实例^[4][5]

TLR8抗体可以用于miR-21激活背根神经节中TLR8并参与神经病理性疼痛

哺乳动物Toll样受体8（TLR8）通过识别内源和外源性刺激促进防御性炎症反应,参与机体免疫应答过程。另外,TLR8还可以识别单链和双链RNA。miR-21作为与疼痛密切相关的小RNA,在体外可以通过外泌体的形式作用于免疫细胞中的TLR8。围绕TLR8和miR-21,本文研究了外周神经损伤后TLR8和miR-21在背根神经节（dorsal root ganglion,DRG）中的表达分布以及它们在神经病理性疼痛中的作用和机制。

方法采用单侧L5脊神经结扎（SNL）的方法建立神经病理性疼痛模型;行为学方法检测SNL和鞘内注射miR-21 mimic后不同时间点WT小鼠和Tlr8-/-小鼠的机械性触诱发痛和热痛觉过敏行为;TLR8抗体免疫荧光双标检测TLR8在DRG神经元细胞器的定位;原位杂交实验检测miR-21在DRG神经元表达及与TLR8的共标情况;实时定量PCR检测SNL、鞘内注射TLR8激动剂VTX-2337和miR-21 mimic后多种炎症细胞因子（CCL2、TNF-a、IL-1b、IL-6）mRNA的表达变化;Western Blot检测鞘内注射VTX-2337及miR-21 mimic后DRG中重要的胞内信号分子pNFkB、pERK、pJNK、p-P38的表达变化;在建立SNL疼痛模型手术的同时脊神经内注射miR-21的抑制剂（miR-21 antagomic）,检测机械性触诱发痛行为变化。

TLR8抗体结果（1）敲除Tlr8基因对基础疼痛阈值、运动功能、神经纤维标记物及化学递质的表达均没有影响,可以缓解SNL诱导的痛觉过敏;（2）TLR8在细胞内主要分布在溶酶体和内涵体中,少量表达于内质网;（3）鞘内注射TLR8激动剂VTX-2337后,诱导ERK磷酸化水平增高,而对NFkB、P38和JNK的磷酸化无影响。SNL诱导的DRG中pERK表达增多,但在Tlr8-/-小鼠上被明显抑制;（4）鞘内注射VTX-2337诱导炎症细胞因子CCL2、TNF-a、IL-1b的mRNA表达增加,这种增加可被Tlr8基因敲除降低;SNL后CCL2、TNF-a、IL-1b、IL-6的mRNA上调,在Tlr8基因敲除小鼠中表达降低;（5）SNL后miR-21在DRG中表达增加,在SNL10d升高最明显。miR-21在DRG的大中小神经元中都有分布,且与TLR8共标;（6）鞘内注射miR-21 mimic后,诱发机械性触诱发痛行为并激活ERK通路,诱导炎症细胞因子CCL2、TNF-a、IL-1b、IL-6的mRNA表达增加,而在Tlr8基因敲除小鼠上有所减轻;（7）L5脊神经注射miR-21 antagomic后,可以明显缓解SNL诱导的机械性触诱发痛行为。

参考文献

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[4]Pattern recognition receptors in chronic pain:Mechanisms and therapeutic implications[J].Jungo Kato;;Nilesh M.Agalave;;Camilla I.Svensson.European Journal of Pharmacology,2016

[5]李思思.miR-21激活背根神经节中TLR8并参与神经病理性疼痛[D].南通大学,2018.