VAL-CIT-PAB的合成

介绍

VAL-CIT-PAB的中文名称为（S）-2-（（S）-2-氨基-3-甲基丁酰胺）-N-（4-（羟甲基）苯基）-5-脲戊酰胺，分子式为C18H29N5O4。外观为浅棕色固体。

图一 VAL-CIT-PAB

合成

将（9H-芴-9-基）甲基（（S）-1-（（（S）-1-（（4-（羟甲基）苯基）氨基）-1-氧代-5-脲基戊烷-2-基）氨基）-3-甲基-1-氧代丁烷-2-基）氨基甲酸酯（4.0g，6.65mmol）溶解在DMF（80mL）中并加入二乙胺（14mL）。将反应混合物搅拌24小时。将反应混合物蒸发至干，得到残余物。残余物用二氯甲烷滴定，得到2.5g浅棕色固体VAL-CIT-PAB，定量产率。该化合物无需进一步纯化即可用于下一步[1]。

图二 VAL-CIT-PAB的合成

向100 mg（0.199 mmol，1.0 eq）Fmoc-Cit PABOH 26的3.9 mL无水DMF溶液中加入318μΙ（1.6 mL/mmol 26）哌啶，在23°C下搅拌混合物3小时（TCL（CH2CI2:MeOH/9:1）Rf:0.05[Nin]），然后用10 mL甲苯稀释混合物，减压浓缩并与10 mL甲苯共蒸发三次。将粗制固体H2N-Cit-PABOH重新溶解在900μ干DMF中，并在23°C下与142μ（0.7956 mmol，4.0 eq）DiPEA一起加入到101 mg（0.199 mmol，1.0 eq）Fmoc-Val-OPfp在900μ干燥DMF中的溶液中。在23°C下搅拌混合物24小时（TCL（CH2CI2:MeOH/8:2）Rf:0.15[UV254，CAM]），然后加入318μ（1.6 mL/mmol 26）哌啶，并在23°C下搅拌混合物1小时。将混合物用10mL甲苯稀释，减压浓缩，并与10mL甲苯共蒸发三次。所得残余物通过硅胶快速色谱法（CH2CI2:MeOH/1:0-95:5-9:1-8:2）纯化，得到70mg（0.185mmol，93%）H2N-Val-Cit PABOH 27，为无定形淡黄色固体VAL-CIT-PAB[2]。

图三 VAL-CIT-PAB的合成2

将96.3（31.8 g）溶解在二氯甲烷（650 mL）中，并向溶液中加入三氟乙酸（4.85 mL）。反应混合物在室温下搅拌3小时。减压浓缩溶剂，得到粗标题化合物和4-（（S）-2-（（S，2-氨基-3-甲基丁酰胺基）-5-脲基戊酰胺基）苄基2,2,2-三氟乙酸酯的混合物。将粗物质溶解在1∶1二恶烷/水溶液（300mL）中，并向溶液中加入氢氧化钠（5.55g）。混合物在室温下搅拌3小时。真空浓缩溶剂，使用CombiFlash系统通过反相HPLC纯化粗产物，用5-60%乙腈在含0.05%v/v氢氧化铵的水中的梯度洗脱，得到化合物VAL-CIT-PAB[3]。

图四 VAL-CIT-PAB的合成3

参考文献

[1]SOARES ,R.B. L,HURT , et al.COMPOUNDS, COMPOSITIONS, METHODS, AND USES FOR TREATING CANCER AND IMMUNOLOGICAL DISORDERS[P].US2019041486,2020-02-13.

[2]TAO ,Zhi-Fu,DOHERTY , et al.BCL XL INHIBITORY COMPOUNDS HAVING LOW CELL PERMEABILITY AND ANTIBODY DRUG CONJUGATES INCLUDING THE SAME[P].WO2015US64693,2016-06-16.

[3]KLAHN ,Philipp,BRÖNSTRUP , et al.NEW TARGETED CYTOTOXIC RATJADONE DERIVATIVES AND CONJUGATES THEREOF[P].EP2018071507,2019-02-14.