组培中琼脂粉不凝固或偏软？该怎么办？

琼脂粉又称寒天粉，果冻粉。它是提取自天然石花菜、江蓠菜、紫菜，采用科学方法精炼提纯的天然高分子多糖物质。粉末状，可以直接冲茶或加入果汁中喝，比较方便。口感和它的使用量有关，用量越多，呈现出脆硬的口感，用量少，口软较柔软嫩滑。此外，在生物实验中也常常用琼脂粉来配培养基，有时会发现琼脂粉不凝固或偏软，本文将简要分析可能的原因。

琼脂粉不凝固

1. 组培室刚运营的时候，工作人员经验不足，琼脂粉忘加了。

2. 琼脂添加的量算错了，少加了。

3. pH误差较大，差1以上; 忘记调节pH。这种情况很容易造成培养基出现不凝固，偏软的现象。平常pH计也会因为各种原因出现偏差，所以需要定期校准。

琼脂粉偏软

1. 琼脂粉用量问题

琼脂用量的差异主要出现在不同强度和不同批次的琼脂粉上，所以每次更换琼脂必须要做好测试工作。

2. pH问题

平时要多留心在正常情况下，灭菌后的培养基pH值与所调节的pH值相比下降了多少。例如冬天一般会下降0.2-0.3个pH，夏天则会下降0.3-0.4，不同灭菌锅之间也会有差异。

一旦培养基出现问题，我们最关心的是灭菌后的培养基pH值。所以组培室如果配的培养基凝固的不好，第一时间会校准pH计，再测量那些有问题的。

通过校准pH计，检查仪器是否准确。大多数情况下仪器会有偏差，这是导致培养基凝固不好的一个原因。

3. 琼脂过度水解问题

pH计没问题，再测量偏软培养基的pH值。绝大部分会pH偏低。琼脂的水解比例加大，有效琼脂粉含量下降，导致凝固性能下降。甚至有时候排冷气的时间加长，或者灭菌结束后闷在锅里一段时间，或者灭菌后的培养基放在太热的空调房里，冷凝时间加长等等，都会造成琼脂的水解。

在同等pH和灭菌条件下，部分琼脂会水解的厉害一些，前后会下降0.4-0.5个pH，针对这类琼脂，需要在调节pH时比平时高0.2左右，灭菌出来的pH就会跟平常所灭的培养基一样，凝固也会好很多。

还有一种情况会造成琼脂粉损失，培养基加热过程中搅拌不到位，粘锅了，致使培养基颜色加深，往往凝固也不好。