醋酸戈舍瑞林的说明书

背景及概述^[1][2]

醋酸戈舍瑞林是促性腺激素释放激素人工合成10肽。戈舍瑞林被用于控制子宫内膜异位症及子宫腺肌病的临床症状和体征，预防子宫内膜异位症术后复发，均有良好的效果。长期使用醋酸戈舍瑞林可抑制脑垂体促黄体生成素的合成，从而引起男性血清睾丸酮和女性血清雌二醇的下降，停药后这一作用可逆，初期用药时醋酸戈舍瑞林可暂时增加男性血清睾丸酮和女性血清雌二醇的浓度。

本药是一种合成的、促黄体生成素释放激素的类似物，长期使用可抑制垂体的促黄体生成激素的分泌，从而引起男性血清睾酮和女性血清雌二醇的下降，停药后这一作用 是可逆的。男性病人在次用药之后21日左右，睾酮浓度可降低到去势后的水平，在每 28天用药1次的治疗过程中，睾酮浓度一直保持在去势后的浓度范围内。

这种睾酮抑制作用可使大多数病人的前列腺肿瘤消退，症状改善。女性患者在初次用药后21日左右，血清雌 二醇浓度受到抑制，并在以后每28天的治疗中维持在绝经后水平。这种抑制与激素依赖性的乳腺癌，子宫内膜异位症相关。

结构

用法用量^[3]

缓释植入剂：3.6mg。

腹前壁皮下 注射：每次3.6mg，每4周1次。子宫内膜异位症的治疗不应超过6个月。

作用和用途^[3]

为促黄体生成素释放激素的一种类似物，长期使用本品可抑制脑垂体促黄 体生成素的合成，从而引起男性血清睾丸酮和女性血清雌二醇的下降，停药后这一作用可逆，初期用药时本品可暂时增加男性血清睾丸酮和女性血清雌二醇的浓度。男性病人在第1次注射此药后21日左右血清睾丸酮浓度下降至去势水平，并在以后的治疗中维持此浓度，这可使大 多数病人的前列腺肿瘤消退，症状有所改善。女性患者在初次 给药后21日左右血清中雌二醇度受到抑制，并在以后每28日 的治疗中维持在绝经后水平。本品半衰期为2～4小时，对肾功能不全的病人其半衰期将会增加。

用于子宫内膜异位症、可用激素治疗的前列腺癌、绝经前期及围绝经期妇女的乳腺癌。

药代动力学^[1]

本药具有几乎完全的生物利用度。每4周使用一注射埋植剂，可保持有效血药浓度，而无组织蓄积。诺雷德的蛋白结合能力较差，在肾功能正常的情况下，血浆清除半衰期为2-4小时，肾功能不全病人的半衰期将会延长，但对于每月都使用埋植剂的患者来说，这影响非常小，故没有必要改变这些病人的用量。在肝功能不全的病人中，药代动力学无明显的变化。

毒理研究^[1]

在长期重复使用诺雷德的雄性鼠中，曾观察到良性脑垂体肿瘤的发病率上升，这一事实与以前已观察到的行外科去势后的大鼠的情形相似，但尚未发现与人体使用的经验有任何关联。在小鼠实验中，长期重复使用数倍于人类常用剂量的诺雷德后，可发现胰岛细胞及幽门部胃粘膜细胞增生。这些事实与临床的关系尚不清楚。

不良反应^[3]

可出现皮疹、潮红、性欲下降、关节痛、低血压或高血压，偶见注射位置上有轻度瘀血。男性可出现乳房肿胀和触痛、骨骼疼痛暂时性加重、尿道梗阻和脊髓压缩。女性可出现骨密度丢失、多汗、头痛、情绪变化、抑郁、阴道干燥、乳房大小的变化。治疗初期乳腺癌患者会有症状的加剧。子宫肌瘤患者可见肌瘤退行性变性。极少数子宫内膜异位症者在治疗期 间闭经，停止治疗后月经不恢 复。

注意事项^[3]

1. 对促性腺激素释放激素 (GnRH)类似物过敏者、孕期和哺乳期妇女禁用。

2. 有尿道阻塞和脊髓压迫倾向及患有代谢性骨病的患者慎用。

3. 对子宫内膜异位症患者，加入激素替代疗法(每天给予雌激素和孕激素制剂)可以减少骨质丢失和血管舒缩症状。

制备 ^[4]

一种戈舍瑞林的固相合成方法，包括以下步骤：

步骤一、根据预设替代度sub（0.6mmol/g）=n（合成规模）/（X(裸2-CTC Resin+n*M）氨基酸分子量这里指Fmoc-Pro-OH 的分子量）可计算出X(裸2-CTC Resinz的质量)=266g Fmoc- Pro-OH在合成树脂的步骤中投料量为摩尔量的1.3倍即计算得出Fmoc-Pro-OH为87g将称取替代度为1.1~1.3mmol/g 的2-CTC Resin266g（合成规模200mmol）加入反应柱中同时加入 3000mlDMF溶胀20min，溶胀后抽掉DMF，在加入3000mlDMF洗涤两次，每次1min.将称量好的 Fmoc-Pro-OH87g 在DMF/DCM的混合溶液中冰浴条件下加入摩尔量两倍的DIPEA(N，N-二异 丙基乙胺)的作用下，室温反应，反应时间由所期待的替代度决定。

反应后处理DMF洗涤5次 每次3000ml每次1min，然后加入3000ml封闭液（DCM：甲醇：DIPEA=80：15：5）封闭两次每次 10min得到sub=0.6mmol/g 的Fmoc-Pro-CTC Resin，加入3000ml20%DBLK（哌啶：DMF=1：4）去 除Fmoc两次，每次时间为10min待去除完毕后加入3000m的DMF洗涤两次，得到H-Pro-CTC Resin。

步骤二、按照常规的固相合成方法，将步骤一中的脱完Fmoc的H- Pro-CTC Resin 用DMF洗涤4次，每次3000ml，洗涤时间1min，将称量好Fmoc-Arg(NO2)-OH9(摩尔量的3倍)、 和HOBT(摩尔量的3倍)投入反应柱中补加DIC、反应1h、待反应完毕后取树脂20-30粒用少量 DMF洗涤两遍进行茚三酮检测显阳性则表明反应未完全需继续反应或是重复偶联，若检测显阴性则表明反应完全可进行下一步的偶联反应，按以上步骤依次偶联以下Fmoc保护的氨基酸Fmoc-Leu-OH、Fmoc-D-Ser(tBu)-OH和Fmoc-Tyr(Bzl) -OH到Fmoc-Tyr(Bzl)-D- Ser(tBu)-Leu-Arg(NO2)-Pro-CTC Resin；

步骤三、将Fmoc-Tyr(Bzl)-D-Ser(tBu)-Leu-Arg(NO2)-Pro-CTC Resin加入 3000mlDBLK去除Fmoc 后DMF洗涤4次，每次3000ml，时间1min，加入称量好HBTU（摩尔量的3 倍）和Fmoc-Ser-OH(摩尔量的3倍)投入反应柱中补加DIPEA和DCM使其搅拌均匀反应10min 抽掉反应液加入DMF洗涤3次，每次3000ml，洗涤时间1min取树脂20-30粒茚三酮检测显阳性则表明反应未完全需继续反应或是重复偶联，若检测显阴性则表明反应完全可进行下一步的偶联反应按以上步骤偶联Fmoc-Trp-OH得到Fmoc-Trp-Ser-Tyr(Bzl)-D-Ser(tBu)-Leu- Arg(NO2)-Pro-CTC Resin；

步骤四、按照常规的固相合成方法同步骤二，采用HOBT/DIC、反应1h、DMF作溶剂依次偶联Fmoc-His(Trt)-OH、Pyr得到H-Pyr-His(Trt)-Trp -Ser-Tyr(Bzl)-D-Ser(tBu)-Leu- Arg(NO2)-Pro-CTC Resin肽树脂520g；

步骤五、按1：10（w：v）的树脂与裂解液的比例配制全保护裂解液5200mL（V三氟乙醇： V二氯甲烷=1：4）加入到H-Pyr-His(Trt)-Trp-Ser-Tyr(Bzl)-D-Ser(tBu)-Leu-Arg(NO2)-Pro- 2-CTC Resin肽树脂中的搅拌反应2h，待反应完毕后过滤抽掉树脂保留溶液目的去除其载 体2-CTC Resin；

步骤六、将全保护裂解液取出1ml作HPLC分析定位出峰时间1，然后再将其溶液用 DIPEA（N，N-二异丙基乙胺）调成偏碱性PH=7.8-8.5优选7.8-8.2按摩尔量的3倍将称量好的盐酸氨基脲和PyBop（1H-苯并三唑-1-基氧三吡咯烷基六氟磷酸盐[用于肽的偶联剂）加入 PH在7.8-8.2左右的全保护裂解液中进行反应偶联，反应时间1h，待反应完毕后取出1ml同样条件下作HPLC分析定位出峰时间2。

然后根据峰型的变化及有无前移情况从而判断跟踪氨基脲的偶联情况，如峰型有变化但反应前的峰1没有完全转变到反应1h后的峰2说明还未反应完全需继续反应，若反应前的峰1完全转变为反应1h后的峰2说明已经反应完全则可以进行下一步实验最后得到保留侧链保护基的戈舍瑞林肽溶液即Pyr-His(Trt)-Trp-Ser- Tyr(Bzl)-D-Ser(tBu)-Leu-Arg（NO2）-Pro-Azgly-NH2再将其溶液旋蒸浓缩1h后变为淡黄 色粘稠状物；

步骤七、配置20%TFA/DCM 的裂解液（v：v=1：4）缓慢加入到步骤六中的粘稠状物中使其搅拌室温裂解2h，再将其裂解液缓慢加入冰冻的乙醚中放置30min进行沉降即得到去除His(Trt)上的侧链保护基Trt前体肽II Pyr-His-Trp-Ser-Tyr(Bzl)-D-Ser(tBu)-Leu- Arg（NO2）-Pro-Azgly-NH2 320g。

步骤八、将步骤七的白色固体粗肽真空抽干按1g/4ml用甲醇溶解溶解体积为 1110ml，加入甲酸铵32g和Pa/c 16g进行氢化反应去除肽序中侧链保护基NO2和Bzl，从而得到戈舍瑞林粗肽Pyr-His-Trp-Ser-Tyr-D-Ser(tBu)-Leu-Arg-Pro -Azgly-NH2甲醇溶液；

步骤九、将步骤八的氢化反应后的甲醇溶液过滤后得到995mL加入5倍量的纯水将样品析出离心得到纯度90%的戈舍瑞林粗肽固体。

步骤十、制备得到戈舍瑞林。

主要参考资料

[1] CN201510208322.X 醋酸戈舍瑞林微球的制备方法

[2] 戈舍瑞林用于乳腺癌治疗的研究进展

[3]  实用药物手册

[4] CN201510005951.2 醋酸戈舍瑞林的固相合成方法