毛蕊花糖苷的提取

地黄为玄参科植物地黄的新鲜或干燥块根，为玄参科植物。广泛分布于中国河南、湖北、山西、四川、浙江、内蒙古、湖南、山东、辽宁和其他省市。鲜地黄性寒，味甘、苦，有清热生津、凉血、止血效果；生地黄性寒，味甘，具有清热凉血、养阴、生津的功效；熟地黄性微温，味甘，具有滋阴补血、益精填髓的效果。经过近30年的研究总结，已大致确定地黄的主要成分有苷类、糖类及氨基酸三大类，苷类含量最多且种类丰富，其中毛蕊花糖苷属于苯乙醇苷类，是地黄药材质控指标之一，毛蕊花糖苷的别名为麦角甾苷、毛蕊花苷、类叶升麻苷，其英文名为Acteoside、Verbascoside、Kusaginin，其分子式为C29H36O15，分子量为624.59，结构式如图所示：

毛蕊花糖苷化学结构式

查阅文献发现已经有很多分离纯化毛蕊花糖苷化合物的方法，例如从裸花紫珠、肉苁蓉、桂花、毛泡桐花中提取分离毛蕊花糖苷，这些分离纯化过程主要采用反复柱层析的方法来获取高纯度的毛蕊花糖苷样品，反复层析过程存在耗时长、溶剂耗费量大等缺陷；另外，有多篇文献报道采用高效液相色谱分析这些植物中的毛蕊花糖苷含量。目前尚未有文献报道从地黄中制备性分离纯化毛蕊花糖苷的高效方法。

提取方法

一种从中药地黄中提取分离毛蕊花糖苷的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤：

A)提取：将干燥生地黄切成小块，加入体积分数75％乙醇水溶液，加热回流提取2～5次，合并所有提取液，过滤，滤液蒸馏回收试剂得地黄总浸膏；

B)大孔树脂富集毛蕊花糖苷粗品：将D101型大孔吸附树脂装柱，将步骤A)制备的地黄总浸膏上柱，吸附完全后，用乙醇水溶液进行梯度洗脱，所述梯度洗脱的程序依次为：纯水、5％、10％、20％体积浓度的乙醇水溶液，收集5％和10％体积浓度的乙醇水溶液洗脱得到的洗脱液，浓缩得毛蕊花糖苷粗品；

C)高速逆流色谱分离纯化制备毛蕊花糖苷纯品：将步骤B)制备的毛蕊花糖苷粗品进行高速逆流色谱分离纯化，以体积比1～2:3～4:5的乙酸乙酯、正丁醇与水为高速逆流溶剂体系，所述高速逆流溶剂体系中，有机相和水相的体积比为1:1，将所述高速逆流溶剂体系充分混合均匀，静置饱和，分层，分别得到上相和下相，取上相为固定相，下相为流动相，取毛蕊花糖苷粗品，用体积比1：1的上相和下相的混合溶剂溶解后进样，高速逆流色谱分离，紫外检测器检测，根据紫外检测器光谱图的峰形收集对应流出液，将含有毛蕊花糖苷的流出液浓缩干燥，制得毛蕊花糖苷纯品。