异硫氰酸荧光素的生物用途和应用转化

异硫氰酸荧光素，英文名为Fluorescein isothiocyanate，常温常压下为黄色固体粉末。异硫氰酸荧光素是一种胺活性衍生物的荧光染料，可用作荧光标记试剂，用于蛋白荧光标记和是医学诊断药物示踪，在医学诊断方面有着重要的应用。

溶解性

异硫氰酸荧光素属于异氰酸酯类有机化合物，遇水会分解。在强极性的有机溶剂中有一定的溶解性，但是在丙酮，乙醚以及石油醚中溶解性差。

生物用途

异硫氰酸荧光素具有高吸收率、优良的荧光量子产率和良好的水溶性等特点，是生物学中应用最为广泛的一种绿色荧光素衍生物，其异硫氰酸基团可与蛋白的氨基末端或者伯胺反应从而实现包括抗体，凝集素在内的蛋白标记。除了用作蛋白质标记物，还可用作蛋白质荧光示踪剂，标记抗体用以快速鉴定病原体，以及用于蛋白质和多肽（HPLC）的微量测序。异硫氰酸荧光素是一种胺活性衍生物的荧光染料，具有广泛的应用，作为抗体和其他探针标记，用荧光显微镜，流式细胞仪、免疫荧光方法如ELISA和Western印迹实验。[1]

应用转化

图1 异硫氰酸荧光素的应用转化

将异硫氰酸荧光素负载在氨基甲基聚苯乙烯小球上，以检查荧光素标记的小球是否在裂解过程中发生不期望的漂白效应。将氨甲基化聚苯乙烯（100-200目）在N,N-二甲基甲酰胺中膨胀2小时，然后排出混合物。将该混合物加入到N,N-二甲基甲酰胺中的异硫氰酸荧光剂（1.2当量）和DIPEA（2当量）的混合物中，所得的反应混合物搅拌2小时后，排出树脂，再用N,N-二甲基甲酰胺清洗树脂，然后再依次用二氯甲烷和甲醇洗涤，最后在真空下干燥荧光素标记的固体载体，所得的固体需要保存在黑暗环境中。[2]

储存条件

异硫氰酸荧光素化学性质较为活泼，分子结构中含有异硫氰结构单元，并且具有一定的吸湿性遇水会水解，因此异硫氰酸荧光素需要低温（-20度）保存在干燥的环境中。

参考文献

[1] Smith LM, et al. Nature. 1986 Jun 12-18;321(6071):674-9.

[2] Hurevich, Mattan et al Organic Letters, 16(6), 1794-1797; 2014