11-氧-罗汉果甜苷V的制备和提取方法

背景及概述^[1]

11-氧-罗汉果甜苷V，又名：11-O-罗汉果甜苷V(11-oxo-Mogroside V)，分子式：C60H100O29，分子量:1285.43，同样是罗汉果中特有的一种葫芦烷型四环三萜皂苷，同样是一种天然甜味剂。在天然植物罗汉果中，11-氧-罗汉果甜苷V的含量比较低，仅仅是罗汉果甜苷V含量的10％～15％。目前获得高含量的11-氧-罗汉果甜苷V的方法，是通过物理方法从罗汉果提取物中富集、分离。

制备^[1-2]

报道一、

(1)氧化反应：取罗汉果甜苷V100g(76.5mmol)，溶解于500g水中，得罗汉果甜苷V水溶液；加入高锰酸钾15g(94.9mmol)，搅拌反应1.5h，反应结束后，得到氧化反应液；

(2)除盐浓缩：将所得氧化反应液先通过装有001×7型阳离子交换树脂的树脂柱，再通过装有201×7型阴离子交换树脂的树脂柱，除盐，收集除盐后的物料，然后在真空度为-0.085MPa、温度为65℃条件下减压浓缩，浓缩至固形物含量为36％，干燥，得11-氧基-罗汉果甜苷V成品97.13g。

经高效液相色谱(HPLC)外标法测定，本实施例所得11-氧基-罗汉果甜苷V的含量为98.07％，。11-氧基-罗汉果甜苷V的收率为96.71％。

报道二、

（1）正丁醇萃取：将100g罗汉果甜苷V精制母液用500g水溶解，加入500g正丁醇进行萃取，分离水层，得正丁醇层；

（2）浓缩析晶：将步骤（1）所得正丁醇层在80℃、真空度为-0.07MPa下，减压浓缩至浓缩液的质量浓度为25%，冷却，在15℃，转速120r/min下，搅拌析晶12h，过滤，得晶体和正丁醇析晶母液，将晶体干燥，得18.2g罗汉果甜苷Ⅵ；

（3）聚酰胺层析：将步骤（2）所得正丁醇析晶母液在80℃、真空度为-0.07MPa下，减压浓缩至无醇，将所得70g浓缩物用1750g水溶解，以1BV/h的流速通过聚酰胺层析柱（其中，聚酰胺的用量为420g，层析柱的高径比为10:1），收集上柱流出液，在80℃、真空度为-0.07MPa下，减压浓缩，干燥，得10.8g罗汉果甜苷V；

（4）梯度洗脱：先用2BV体积浓度为20%的乙醇溶液，以0.5BV/h的流速对步骤（3）过柱后的聚酰胺层析柱进行洗脱，再用4BV体积浓度为80%的乙醇溶液，以0.5BV/h的流速进行洗脱，收集体积浓度为80%的乙醇溶液的洗脱液，在65℃下，浓缩至浓缩液的质量浓度为30%，冷却，在25℃下，析晶24 h，过滤，干燥，得13.8g罗汉果11-O基苷V。

本实施例所得罗汉果甜苷V、Ⅵ和11-O基苷V均为白色粉末，经高效液相色谱外标法检测，所得罗汉果甜苷Ⅵ的纯度为97.5%，收率为88.28%；罗汉果甜苷V的纯度为91.9%，收率为91.06%；罗汉果11-O基苷V（11-氧-罗汉果皂甙V）的纯度为98.2%，收率为87.43%。

参考文献

[1] [中国发明,中国发明授权] CN201910785269.8 一种11-氧基-罗汉果甜苷V的半合成方法