鲑降钙素的纯化和制剂

背景及概述^[1]

鲑降钙素(英文全称为Calcitonin Salmon)是治疗骨质疏松症的常用药物之一，能够抑制破骨细胞的活性、抑制骨盐溶解，阻止骨内钙释出；改善骨密度，有效缓解疼痛症状；降低骨折的危险性和降低血钙，临床上主要用于治疗老年骨质疏松症、绝经后骨质疏松症和骨折移癌症高钙血症。

纯化方法^[2]

1.样品处理

在鲑降钙素氧化液中加入少许乙腈超声至液体澄清，用孔径为0.45um滤膜过滤后备 用。

2. 纯化

纯化条件：色谱柱为C8反相硅胶柱，直径和长度为：5cm×25cm，流动相：A相：体积百分 比0.1%甲酸水溶液；B相：体积百分比0.1%甲酸乙腈溶液。流速：60-80mL/min。检测波长： 205nm。梯度：B%：体积浓度梯度10-50%，30-50min。进样量为2.5-4g。

纯化过程：用体积浓度10%的B相平衡色谱柱，上样量为0.5-1.5L样品溶液。线性梯 度洗脱收集目标峰，将收集好的肽溶液放置备用。

3．转盐

用体积浓度60%以上的去离子水冲洗C18反相硅胶柱至流出液为中性，以体积百分比 0.3%醋酸盐水溶液和色谱纯乙腈溶液平衡色谱柱，上样已收集好的目标峰溶液。线性梯度 洗脱：10-30min，体积浓度梯度90-95%的醋酸盐水溶液；30-90min，体积浓度梯度30-90%的 乙腈溶液，收集全部的目标峰。

4．将收集的溶液进行减压浓缩至1g/50mL，浓缩温度不超过37℃,然后冷冻干燥得 纯度大于99.0%的鲑降钙素，收率32.3%。

制剂方法^[3]

一种鲑降钙素注射液的制备工艺如下：

处方：鲑降钙素 16.7mg

冰醋酸 2.0g

醋酸钠 2.0g

氯化钠 7.5

注射用水 加至 1000ml

（规格：1ml∶100IU）

制备工艺：

A、将内包材安瓿瓶用注射用水洗涤后高温杀菌干燥备用；

B、分别称取冰醋酸、醋酸钠、氯化钠各2.0g、鲑降钙素16.7mg备用；

C、在稀配罐中先加800ml注射用水，降至25℃左右，再依次加入冰醋酸、醋酸钠、氯化钠，搅拌完全溶解，再加注射用水至1000ml，搅匀；

D、稀配罐中充入洁净氮气15分钟到饱和后保持一直充洁净氮气，待稀配罐中的空白辅料溶液冷却至25℃时加入处方量的鲑降钙素，低速搅拌至完全溶解；

E、药液经0.22μm金属过滤器过滤后至缓冲罐，再从缓冲罐回到稀配罐中，如此反复三次循环后至无泡沫时在稀配罐中取样测PH、含量，检测合格后灌封于上述备用安瓿瓶中，检漏、灯检、包装即得。

灌封获得的样品检测含量、pH值和可见异物。

参考文献

[1] [中国发明,中国发明授权] CN201510119451.1 一种纯固相合成醋酸鲑降钙素的方法

[2] [中国发明] CN201611049524.5 一种纯化鲑降钙素的方法

[3] [中国发明] CN201910215919.5 一种鲑降钙素注射液的制备工艺