沙氏琼脂培养基(SDA)图片的应用

背景^[1-3]

沙氏琼脂培养基(SDA)用于霉菌和酵母菌的分离培养（GB/T 16294-2010医药工业洁净室(区)沉降菌的测试方法）。

成分(g/L)：酪蛋白胰酶消化物、动物组织的胃酶消化物10.0；葡萄糖 40.0；

琼脂 15.0；；pH值5.6±0.2、25℃。

检验原理：酪蛋白胰酶消化物、动物组织的胃酶消化物提供氮源；葡萄糖提供碳源；琼脂是培养基的凝固剂。

用法：称取本品65.0g,加热搅拌溶解于1000ml纯化水中,121℃高压灭菌15分钟,冷却至60℃时,倾入无菌平皿,备用。制备好的培养基平皿宜在2℃-8℃保存，一般以一周为宜或按厂商提供的标准执行。采用适宜方法在平皿上做好培养基的名称、制备日期记录的标记。

医药工业洁净室(区)采用沉降法，在设备或房间完成灭菌后，通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿（一般多采用90mm直径硼硅酸玻璃培养皿，俗称沉降碟），经若干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数，以平板培养皿中的菌落数来判定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净室（区）的洁净度。

应用^[4][5]

用于南海局部海洋沉积物中真菌多样性及产酶活性初步研究

以11份南海海洋沉积物为材料，利用平板涂布法分离其中的海洋真菌，通过培养观察真菌的形态特征，并进行ITS序列分析，对分离出的真菌进行初步鉴定。针对目前工业中较为重要的功能酶类，利用6种筛选培养基对海洋真菌进行产酶活性筛选，并对其中一株产酶活性相对较高的真菌进行了产酶条件研究。

(1) 利用高盐察氏培养基、YPD培养基、玉米粉琼脂培养基、MEA培养基、改良PDA培养基、沙氏培养基和豆芽汁培养基，并添加氨苄青霉素作为抑菌剂，从11份海洋沉积物样品中共分离出1689株真菌，排除重复，初步归类为41株真菌。确定分离培养基为YPD培养基。

(2) 经形态学研究和ITS序列分析，初步将这些真菌鉴定为15个属：枝顶孢属(Acremonium)、Acrodontium、链格孢属(Alternaria)、曲霉属(Aspergillus)、烟管菌属(Bjerkandera)、毛壳菌属(Chaetomium)、枝孢属(Cladosporium)、Dichotomomyces、散囊菌属(Eurotium)、赤霉菌属(Gibberella)、Myrmecridium、拟青霉属(Paecilomyces)、青霉属(Penicillium)、Pseudozyma、酵母属(Saccharomyces)。

其中，曲霉属(Aspergillus)和青霉属(Penicillium)为优势菌群，分别占39.00%和12.20%。菌株8m、25m和95a只能鉴定到属，其余38株真菌鉴定为25个形态种。(2)采用透明圈法，将已测序的41株真菌点接于酶筛选培养基上，每个真菌在平板上点接3个重复，28°C恒温培养3–7d。测量不同菌株的透明圈直径和菌落直径，以透明圈直径与菌落直径的差值(D)表示酶活大小。

结果表明，8株真菌产纤维素酶，9株真菌产淀粉酶，5株真菌产复合酶(主要包括蛋白酶、淀粉酶及木聚糖酶活性)，16株真菌产蛋白酶，3株真菌产脂肪酶，未发现产壳聚糖酶的真菌菌株；其中有7株真菌同时产三种酶，4株真菌同时产两种酶。产酶活性大小研究表明，菌株Penicillium sp.41m产蛋白酶活性相对较高，而Acrodontium sp.8m和Aspergillus sp.86b产复合酶活性相对较高。

参考文献

[1]Diverse Deep-Sea Fungi from the South China Sea and Their Antimicrobial Activity[J].Xiao-Yong Zhang,Yun Zhang,Xin-Ya Xu,Shu-Hua Qi.Current Microbiology.2013(5)

[2]Diversity and Antimicrobial Activity of Culturable Fungi Isolated from Six Species of the South China Sea Gorgonians[J].Xiao-Yong Zhang,Jie Bao,Guang-Hua Wang,Fei He,Xin-Ya Xu,Shu-Hua Qi.Microbial Ecology.2012(3)

[3]Chitinolysis by the Marine Ascomycete Corollospora maritima Werdermann:Purification and Properties of a Chitobiosidase[J].W.D.Grant,M.Atkinson,B.Burke,C.Molloy.Botanica Marina.2009(1-6)

[4]Isolation and Characterization of Melanin from a Marine Fungus[J].J.P.Ravishankar,V.Muruganandam,T.S.Suryanarayanan.Botanica Marina.2009(1-6)

[5]曲佳.南海局部海洋沉积物中真菌多样性及产酶活性初步研究[D].陕西理工学院,2014.