Anti-EGFR Antibody的应用

背景^[1-3]

Anti-EGFR Antibody是一类可以特异性结合EGFR的多克隆抗体，主要用于检测EGFR的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多种免疫学实验。

检测原理：双抗体夹心法测定标本中EGFR水平。用纯化的EGFR抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入EGFR，再与HRP标记的EGFR抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的EGFR呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中EGFR浓度。

EGFR（epidermal growth factor receptor）是表皮生长因子受体（HER）家族成员之一。该家族包括HER1（erbB1，EGFR）、HER2（erbB2，NEU）、HER3（erbB3）及HER4（erbB4）。HER家族在细胞生理过程中发挥重要的调节作用。

EGFR广泛分布于哺乳动物上皮细胞、成纤维细胞、胶质细胞、角质细胞等细胞表面，EGFR信号通路对细胞的生长、增殖和分化等生理过程发挥重要的作用。

EGFR表达于正常上皮细胞表面，而在一些肿瘤细胞中常过表达，EGFR的过表达和肿瘤细胞的转移、侵润、预后差有关。EGFR下游的信号转导通路主要有两条：一条是Ras/Raf/MEK/ERK-MAPK通路，而另一条是PI3K/Akt/mTOR通路。

应用^[4][5]

用于MET、EGFR在不同基因类型乳腺癌中的表达及临床意义研究

表皮生长因子受体EGFR(Epidermal growth factor receptor)是原癌基因c-erb B-1的产物,位于7p11-13,属于表皮生长因子受体家族的四个成员之一。由胞内区(酪氨酸激酶区域),短的跨膜区、膜旁区和酪氨酸激酶配体活跃的胞外区域(配体结合域)组成。EGFR能够被大量的生长因子配体激活包括表皮生长因子(EGF)和转换生长因子α(TGF-α)。

EGFR与配体的结合导致酪氨酸激酶残基的磷酸化,引起下游信号的级联反应。表皮生长因子酪氨酸残基配体依赖区域的激活作为信号感应器和调节蛋白的结合位点来调节细胞内基质的信号流程。磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)和AKT通路,RAS/MAPK通路是主要的信号机制,其主要的生物作用包括细胞增殖,生存,血管生成和抑制凋亡研究证实,在许多的恶性肿瘤中出现EGFR的过表达现象。

实验用免疫组化IHC(Immunohistochemistry)和荧光原位杂交FISH(Fluorescence in situ hybridization)方法检测不同基因类型的乳腺癌组织中MET基因、EGFR基因蛋白表达和基因扩增的情况。初步探讨二者与乳腺癌基因分型、临床病理指标的关系以及二者之间的相关性。

根据病理报告中ER、PR、HER-2、Ki-67的表达情况对乳腺癌病例进行分型。方法:采用免疫组织化学链霉亲和素-过氧化物酶法(SP法)和荧光原位杂交(FISH法)检测MET和EGFR在乳腺癌组织中的表达情况。

参考文献

[1]Clinical implications of the intrinsic molecular subtypes of breast cancer[J].Aleix Prat,Estela Pineda,Barbara Adamo,Patricia Galván,Aranzazu Fernández,Lydia Gaba,Marc Díez,Margarita Viladot,Ana Arance,Montserrat Mu?oz.The Breast.2015

[2]A phase II clinical trial of weekly paclitaxel and carboplatin in combination with panitumumab in metastatic triple negative breast cancer[J].S Cowherd,L D Miller,S A Melin,S Akman,S Isom,J Cole,A Pullikuth,J A Lawrence.Cancer Biology&Therapy.2015(5)

[3]Biological,diagnostic and therapeutic relevance of the MET receptor signaling in head and neck cancer[J].Lluís Nisa,Daniel Matthias Aebersold,Roland Giger,Yitzhak Zimmer,Michaela Medová.Pharmacology and Therapeutics.2014

[4]Targeting the MET gene for the treatment of non-small-cell lung cancer[J].F.Gelsomino,F.Facchinetti,E.R.Haspinger,M.C.Garassino,L.Trusolino,F.De Braud,M.Tiseo.Critical Reviews in Oncology/Hematology.2013

[5]袁苗苗.MET、EGFR在不同基因类型乳腺癌中的表达及临床意义[D].郑州大学,2016.