肉豆蔻酸的提取方法

背景及概述^[1][2]

肉豆蔻酸又称十四烷酸。从甲醇中结晶者为白色结晶性或小叶片状蜡状固体。自然界存在于鱼油、椰子油、巴巴苏油及棉籽油中。相对分子质量228.36。相对密度0.8584(60℃)、0.8394(90℃)。熔点58.5℃。沸点326.2℃、250.5℃(13.332×10³Pa)、199℃(2.133×10³Pa)、196.5℃(2.000×10³Pa)、184℃(0.533×10³Pa)、149.3℃(0.133×10³Pa)。折射率1.4274(70℃)。不溶于水，溶于乙醇、甲醇、丙酮、乙醚、石油醚、苯、氯仿、冰醋酸。小鼠静脉注射(43±2.6)mg/kg。

用途：用作表面活性剂、香料、润滑油、涂料、印刷油墨等的添加剂，金属加工及香料溶剂等。在非离子型方面用作山梨糖醇脂肪酸酯、甘油脂肪酸酯、乙二醇脂肪酸酯、丙二醇脂肪酸酯等的原料。这些表面活性剂用作食品乳化剂、色素分散剂、医药及化妆品用乳化剂。在阳离子型方面，肉豆蔻基胺或二甲基肉豆蔻基胺的盐酸盐或醋酸盐，除用作表面活性剂外，还可用作纤维工业助剂、乳化剂及颜料分散剂。在阴离子型方面，肉豆蔻酸钙、镁、锌、钠等，用作化妆品分散剂、乳化稳定剂，对皮肤有良好的柔软性，钠盐可用于医药、化妆品消泡剂。本品还可用作肉豆蔻酸异丙酯、甲酯、辛基月桂酯等的原料，这此酯的凝固点低而广泛用作化妆品原料、软膏;也用作食品香料，而用于饮料、糖果、焙烤食品，是我国GB2760—1996规定允许使用的食用香料。

制法：①椰子油(含肉豆蔻酸17.5%～18.5%)、棕榈仁油(含15%)等在高温高压下水解，制取多种脂肪酸的混合物，然后再精馏分离，可得到肉豆蔻酸。②肉豆蔻精油(含70%～80%)直接精馏分离。

提取方法^[2]

一种从海洋球石藻中提取肉豆蔻酸的方法，依次以：用乙酸乙酯进行萃取；用反相硅胶柱进行层析；用葡聚糖凝胶柱SephadexLH-20进行层析；用反相硅胶柱进行层析；用正相硅胶柱进行层析；用PTLC制备的方法从海洋球石藻中提取肉豆蔻酸。

具体包括以下步骤：

步骤一、制备海洋球石藻乙酸乙酯相萃取物：以乙酸乙酯为萃取剂进行萃取处理，合并萃取液，减压浓缩得到海洋球石藻乙酸乙酯相萃取物；

海洋球石藻生长至稳定期，收获，冷冻干燥获得海洋球石藻藻粉19.3740g，用质量分数为75％的乙醇浸提获得乙醇浸膏5.1247g，加入等体积的乙酸乙酯和水，反复萃取，收集乙酸乙酯相，合并、减压浓缩至干，获得海洋球石藻乙酸乙酯相萃取物4.2357g；

步骤二、反相硅胶柱层析制备豆蔻酸一次粗品：将获得的海洋球石藻乙酸乙酯相萃取物以反相硅胶柱进行层析处理，收集，检测、合并、减压浓缩至干，得到豆蔻酸一次粗品；

将4.2357g海洋球石藻乙酸乙酯相萃取物用适量的分析纯甲醇溶解后，进行反相硅胶(180g)柱层析；依次用水，质量分数为25％的甲醇溶液，质量分数为50％的甲醇溶液，质量分数为75％的甲醇溶液，甲醇洗脱，每个梯度洗脱1.5L，流速控制为30mL/min，每200mL收集1管，旋蒸，初步用TLC分析流出物，合并棕榈酸高浓度流分段，减压浓缩至干，获得肉豆蔻酸一次粗品；

步骤三、葡聚糖凝胶柱SephadexLH-20层析制备肉豆蔻酸二次粗品：将获得的海洋球石藻乙酸乙酯相萃取物以葡聚糖凝胶柱SephadexLH-20进行层析处理，收集，检测、合并、减压浓缩至干，得到肉豆蔻酸二次粗品；

将肉豆蔻酸一次粗品用适量甲醇溶解后，上葡聚糖凝胶柱SephadexLH-20，用甲醇作为洗脱剂进行洗脱，流速控制8S/drop，使用自动收集器收集各馏分，每30min收集一管，初步用TLC分析流出物，合并21至25管的馏分，减压浓缩至干，获得肉豆蔻酸二次粗品；

步骤四、反相硅胶柱层析制备肉豆蔻酸一次精品：将获得的肉豆蔻酸二次粗品以反相硅胶柱进行层析处理，收集，检测、合并、减压浓缩至干，得到肉豆蔻酸一次精品；

将肉豆蔻酸二次粗品，依次采用质量分数为60％，70％，80％，90％，100％的丙酮水体系梯度进行RPC18反相硅胶柱层析，每个梯度洗脱200mL，流速控制为10mL/min，旋蒸，初步用TLC分析流出物，合并肉豆蔻酸高浓度流分段，减压浓缩至干，获得肉豆蔻酸一次精品；

步骤五、正相硅胶柱层析制备肉豆蔻酸二次精品：将获得的肉豆蔻酸一次精品以正相硅胶柱进行层析处理，收集，检测、合并、减压浓缩至干，得到肉豆蔻酸二次精品；

将肉豆蔻酸一次精品经过正相硅胶柱层析，用硅胶粉拌样，硅胶用正己烷饱和后装柱，样品上柱后用正己烷乙醚的体系进行洗脱，所述正己烷和乙醚的体积比为50:1，添加2滴冰醋酸，收集馏分，合并63-67管，减压浓缩至干，获得肉豆蔻酸二次精品；

步骤六、PTLC制备肉豆蔻酸纯品：将获得的肉豆蔻酸二次精品进行PTLC，点样、展开，刮板，样品回收，保存于-20℃，得到肉豆蔻酸纯品；

将肉豆蔻酸二次精品经过PTLC，最终得到肉豆蔻酸：采用高效薄层层析板，在体积比为：石油醚:乙酸乙酯＝15:1的展开剂中展开，前后两端显色，用刀片刮取中间部分，合并，用甲醇溶解，高速离心，收集上清液，减压浓缩至干，最终得到肉豆蔻酸。

主要参考资料

[1]实用精细化工辞典

[2][中国发明]CN201710367721.X一种从海洋球石藻中提取肉豆蔻酸的方法