小鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)ELISA KIT的应用

背景^[1-3]

小鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)ELISA KIT用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗该指标抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗该指标抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的该指标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

人体中正常成熟的白细胞可以分为五类：中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞。嗜酸性粒细胞是白细胞的组成部分，与其他粒细胞一样来源于骨髓的造血干细胞。嗜酸性粒细胞具有杀伤细菌、寄生虫的功能，也是免疫反应和过敏反应过程中极为重要的细胞。嗜酸性粒细胞可以释放颗粒中的内容物，引起组织损伤，促进炎症进展。血液中嗜酸性粒细胞的数量表现为昼夜周期性波动。清晨细胞数减少，午夜时细胞数增多。这种细胞数的周期性变化是与肾上腺皮质释放糖皮质激素量的昼夜波动有关的。当血液中皮质激素浓度增高时，嗜酸性粒细胞数减少；而当皮质激素浓度降低时，嗜酸性粒细胞数增加。

应用^[4]

用于嗜酸性粒细胞诱导食管壁内神经元损伤在贲门失弛缓症发病机制中的探讨

通过分析嗜酸性粒细胞在贲门失弛缓症患者食管肌层的分布以及与食管壁内神经元表达的相关性,研究嗜酸性粒细胞在动物实验及体外实验中对食管壁内神经元的损伤作用及机制。

方法(1)纳入于我院就诊并经胃镜、钡餐及食管测压等确诊为贲门失弛缓症并接受POEM治疗的28名患者作为贲门失弛缓症组,同时选取行外科食管切除术的食管癌患者9例作为对照组。实验组标本取自POEM术中粘膜下隧道建立后,分别活检食管LES部位、LES上方5cm及LES上方10cm部位(远段、中段及近段食管)的环形肌组织。对照组标本取自正常食管组织肌条,同样于术中选取与贲门失弛缓症患者取材部位相对应的食管体部近段、中段及远段的肌层组织。所有标本均行HE染色观察食管肌层组织的嗜酸性粒细胞计数及分布,并比较不同部位之间计数及分布的差异。进行免疫组化和ELISA观察嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)、嗜酸性粒细胞来源神经毒素(EDN)、嗜酸性粒细胞趋化因子以及食管壁内神经元的分布。分析贲门失弛缓症患者食管肌层嗜酸性粒细胞计数与临床数据的关系。

参考文献

[1]The role of mast cells in functional GI disorders[J].Wouters Mira M,Vicario Maria,Santos Javier.Gut.2016(1)

[2]The Chicago Classification of esophageal motility disorders,v3.0[J].P.J.Kahrilas,A.J.Bredenoord,M.Fox,C.P.Gyawali,S.Roman,A.J.P.M.Smout,J.E.Pandolfino.Neurogastroenterol.Motil..2015(2)

[3]Associations among gut permeability,inflammatory markers,and symptoms in patients with irritable bowel syndrome[J].Robert J.Shulman,Monica E.Jarrett,Kevin C.Cain,Elizabeth K.Broussard,Margaret M.Heitkemper.Journal of Gastroenterology.2014(11)

[4]晋弘.嗜酸性粒细胞诱导食管壁内神经元损伤在贲门失弛缓症发病机制中的探讨[D].天津医科大学,2018.