透明质酸染色液的使用方法

背景及概述^[1-2]

透明质酸主要由滑膜衬里细胞的B型细胞产生，是关节液及软骨基质的主要组成成分之一。骨性关节炎滑液中的透明质酸浓度、分子量及黏性均低于正常。解放军总医院风湿科的一项研究显示，骨性关节炎患者滑液透明质酸浓度下降的程度与经X线片证实的关节病变程度呈负相关，并发现观察滑液透明质酸与血清透明质酸的比值能更敏感地反映局部或全身骨性关节炎病变程度。自1974年Peyron首次使用关节内注射治疗骨性关节炎并取得良好疗效以来，现在临床上已得到广泛应用。

透明质酸染色液采用透明质酸酶联合阿利新蓝染色，其原理在于透明质酸酶可以裂解透明质酸和硫酸软骨素的糖苷键。在阿利新蓝染色前用透明质酸酶做标本预处理，与未处理的切片相比，若处理过的切片不着色，则表明组织中存在透明质酸和硫酸软骨素；若预处理没有产生影响，则说明组织中不含透明质酸和硫酸软骨素。

用途^[1]

透明质酸染色液区分结缔组织蛋白多糖中是否硫酸软骨素和透明质酸，根据透明质酸酶可以裂解透明质酸和硫酸软骨素的糖苷键这一特性，同时联合使用阿利新蓝染色液，使上述物质不着色，而未处理的呈亮蓝色，该法需要做阳性对照。

使用方法^[1]

1、取2张阳性对照片和2张实验片，二甲苯脱蜡，通过梯度乙醇后，再入去离子水水化

2、取1张阳性对照片和1张实验片用HAasesolution处理孵育。取另外的1张阳性对照片和1张实验片用阴性对照液处理孵育。

3、流水冲洗。

4、入Alcianbluestain染色

5、流水冲洗。

6、梯度乙醇脱水，二甲苯透明，混合封片剂封片。

主要参考资料

[1] 内科学·卷

[2] 透明质酸染色液说明书