pCAG-D1R病毒基因质粒使用说明

pCAG-D1R病毒基因质粒

基本信息

启动子: CAG

原核抗性: Amp

真核抗性: Puro

克隆菌株: Stbl3

培养条件: 37℃

质粒属性

质粒宿主： 哺乳细胞

质粒用途： 蛋白表达

片段类型： 基因CDS

片段物种： 病毒

原核抗性： 氨苄青霉素

真核抗性： 嘌呤霉素

质粒图谱

pCAG-D1R病毒基因质粒使用说明

1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min；

2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；

3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；

4、42℃热激90s，再冰浴2min；

5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；

6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；

7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；

8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；

9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒。

pCAG-D1R病毒基因质粒注意事项

1、如果您收到的是甘油菌种，请先四区划线，挑取单克隆培养。

2、如果第二天转化平板长的过多，请将质粒按比例稀释后再转化。