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大豆蛋白胨

发布日期:2018/5/17 13:45:02

【背景及概况】[1][2]

培养基是适合微生物生长繁殖或累积代谢产物的营养基质。现代微生物工作中多采用人工配制的培养基,根据不同微生物的营养特点,选择配制不同的培养基。培养基的主要组成包括水、含碳素物质、含氮素物质、无机盐类和其他生长因子。为满足微生物生长繁殖或其他目的的需要,培养基的配制还必须考虑渗透压、各营养成分之间的配比、酸碱度、氧化还原电位等。根据培养基的物理特性可分为固体培养基、半固体培养基和液体培养基;根据其化学组成可分为天然培养基、合成培养基、半合成培养基、基础培养基、加富培养基、基本培养基和完全培养基;根据用途又可分为选择性培养基、鉴别培养基、抑制性培养基、保存菌种用培养基、生产用培养基等。培养基配制完毕,需要灭菌处理后才能使用。

蛋白胨(Peptone)是将肉、酪素或明胶或蛋白质经酸、碱或蛋白酶水解后干燥而成的外观呈淡黄色的粉剂。蛋白质经酸、碱或蛋白酶分解后也可形成蛋白胨。在胃内蛋白质的初步消化产物之一就是蛋白胨。蛋白胨主要含有䏡、胨、 多肽、 二肽和各种氨基酸,还含有少量的氯、钠、钾、钙、镁、铁、锌、锡、铜、铅、锰等离子。1880年纳格里发现将此物质加入细菌培养基后,细菌生长十分良好,首次将这种蛋白质水解不完全的产物命名为蛋白胨。各种动植物蛋白质均可用于制取蛋白胨,但鱼肉蛋白质的氨基酸种类比较齐全,有利于微生物的生长,是制取蛋白胨的重要原料。蛋白胨富含有机氮化合物,也含有一些维生素和糖类。蛋白胨可以作为微生物培养基的主要原料,广泛用应用于微生物、制药领域,植物蛋白胨尤其大豆蛋白胨是专门用于培养链球菌、肺炎球菌、布氏杆菌等,营养丰富,也可用做工业化生产的发酵原料。

【生产】[1][2]

一种以大豆分离蛋白基料生产大豆蛋白胨的方法,包括以下步骤:

1) 将大豆分离蛋白基料和车间工艺水配置成重量百分比为5‑20%的分散液;

2) 根据大豆分离蛋白基料的微生物情况,对其进行巴氏杀菌,灭菌温度 70‑85℃,时间30‑60分钟;

3) 把灭菌处理的物料降温到40‑70℃,使用pH值调节剂调pH值到6.0‑10.0;

4) 加入蛋白酶,蛋白酶和大豆分离蛋白基料干基的重量百分比为0.1‑8%, 在40‑70℃的温度下,酶解1‑8小时;

5) 调酶解液的pH值为6‑7;

6) 然后升温至90‑100℃,保持10‑20分钟,进行灭酶;

7) 经过板框式压滤机过滤或者膜分离提纯精制;

8) 经双效浓缩后喷雾干燥;

9) 检验、包装、入库,既得本产品大豆蛋白胨。

本发明使用蛋白分解酶,所以产品质量高、产品质量稳定,试剂大豆蛋 白胨可以达到50%,工业级大豆蛋白胨可以到达90%;本发明的生产工艺简单,易于操作,成本低。

【应用】[3][4]

1. 一种促进产气荚膜梭菌高产外毒素的培养基,所述培养基由下述重量份的成分组成:牛肉浸粉18‑30重量份,大豆蛋白胨6‑15重 量份,葡萄糖4‑8重量份,NaCl3‑6重量份,加水至1000重量份。本发明的优选技术方案中,所述培养基由下述重量份的成分组成:牛肉浸粉 25重量份,大豆蛋白胨10重量份,葡萄糖5重量份,NaCl5重量份,加水至 1000重量份。本发明的优选技术方案中,所述培养基的pH值为7.0‑8.5,优选pH值为 7.5‑8.0。本发明的优选技术方案中,所述的产气荚膜梭菌选自A型产气荚膜梭菌、B 型产气荚膜梭菌、C型产气荚膜梭菌、D型产气荚膜梭菌、E型产气荚膜梭菌的 任一种或其组合,优选为C型产气荚膜梭菌。

2. 一种对金黄色葡萄球菌分离率高的选择性培养基,配制1000ml选择性培养基的配方中含有大豆蛋白胨45g;甘油450ml;枸橼酸镁5g;氯化钠0.5g;亚碲酸钾45g;芋酸9~12mg;麦芽浸粉1.9g;山柑子萜酮0.2g;蒸馏水加至1000ml。

进一步地,每1000ml选择性培养基还含有酵母膏0.2g。进一步地,每1000ml选择性培养基还含有浓度350g/L的茯苓水煮液200~300ml。进一步地,每1000ml选择性培养基还含有甘氨酸5mg;浓度350g/L的茯苓水煮液200~300ml。

制备方法包括以下步骤:

(1)取茯苓加水煮沸1小时,过滤,取滤液,调整体积到浓度为350g/L,得茯苓水煮液;

(2)取大豆蛋白胨;甘油;枸橼酸镁;氯化钠;亚碲酸钾;芋酸;麦芽浸粉;山柑子萜酮;酵母膏及甘氨酸溶于步骤1所得茯苓水煮液中,混匀过滤后,蒸馏水定容,低温灭菌2次,每次50min,灭菌后分装。

【参考文献】

[1] 农业大词典

[2] 李世伟;王建忠;郭世峰;高建勇.一种利用大豆分离蛋白基料生产大豆蛋白胨的方法. CN201110217180.5,申请日2011-07-19

[3] 熊媛媛;蒋玉文;漆世华;黄涛;郑佳;朱薇;谢红玲;温文生. 一种促进产气荚膜梭菌高产外毒素的培养基及其培养方法和其应用. CN201310086236.7 ,申请日2013-03-19

[4] 董建红;董春红.一种对金黄色葡萄球菌分离率高的选择性培养基. CN201610213819.5 ,申请日2016-04-08