639089-54-6

VX-680的药物是Vertex Pharmaceuticals(VRTX)的产品，它是第一种以奥罗拉激酶(Aurora kinases)为目标，阻止肿瘤增长的药物。该药物主要用于治疗血液肿瘤、结肠癌和乳腺癌。

以N-甲基哌嗪和N-[4-[[4-氯-6-(5-甲基-2H-吡唑-3-氨基)嘧啶-2-基]磺酰基]苯基]氨基环丙羧酸为原料，合成N-(4-((4-((5-甲基-1H-吡唑-3-基)氨基)-6-(4-甲基哌嗪-1-基)嘧啶-2-基)硫基)苯基)环丙烷甲酰胺的一般步骤如下：将N-甲基哌嗪（10 mL）加入化合物D（2.373 g，5.92 mmol）中，反应混合物于110°C搅拌2小时。反应完成后，通过减压蒸馏除去过量的N-甲基哌嗪。将残余物溶解于乙酸乙酯中，依次用碳酸氢钠水溶液洗涤和硫酸镁干燥，随后浓缩。所得残余物通过甲醇结晶纯化，得到目标产物I的无色晶体（1.82 g，产率66%）。产物经1H-NMR（DMSO-d6）表征，化学位移δ分别为0.81（4H，d），1.79（1H，m），2.01（3H，s），2.18（3H，s），2.30（4H，m），3.35（掩蔽信号），5.42（1H，s），6.02（1H，br s），7.47（2H，d），7.69（2H，d），9.22（1H，s），10.39（1H，s），11.69（1H，s）。

参考文献：

[1] Patent: WO2007/14250, 2007, A2. Location in patent: Page/Page column 19

[2] Patent: WO2008/13807, 2008, A2. Location in patent: Page/Page column 7

[3] Patent: WO2004/833, 2003, A1. Location in patent: Page 46

[4] Patent: US2009/105270, 2009, A1

Tozasertib (VX-680, MK-0457)是一种pan-Aurora抑制剂，对Aurora A作用最强，无细胞试验中Kiapp为0.6 nM，而对Aurora B/Aurora C的作用较弱，对Aurora A选择性比其他55种激酶高100倍。唯二的例外是 Fms-related tyrosine kinase-3 (FLT-3) 和 BCR-ABL tyrosine kinase，也可被 Tozasertib 抑制，对应的Ki值均为30 nM和30 nM。Tozasertib 可诱导凋亡和自噬。Phase 2。

Target	Value
Aurora A (Cell-free assay)	0.6 nM(Ki app)
Aurora C (Cell-free assay)	4.6 nM(Ki app)
Aurora B (Cell-free assay)	18 nM(Ki app)
FLT3 (Cell-free assay)	30 nM(Ki)
Bcr-Abl (Cell-free assay)	30 nM(Ki)

虽然VX-680具有多激酶特性，VX-680却诱导相似的细胞毒性，IC50约为300 nM，在G2/M期，核内复制期，及转染ABL或FLT-3激酶的BaF3细胞凋亡时，显示一个Aurora B 类似的抑制表现型。VX-680抑制CAL-62细胞增殖，这种作用存在时间依赖性。用VX-680处理14天，明显降低群体的数量和大小，处理8305C下降达到70%，处理CAL-62, 8505C,和BHT-101下降达到90%。用VX-680处理不同ATC细胞，抑制细胞增殖，IC50为25到150  nM，这种作用存在时间和剂量依赖性。在软琼脂中，VX-680明显削弱不同细胞系形成群落的能力。caspase-3的活性分析显示VX-680诱导不同细胞凋亡。VX-680处理CAL-62 细胞12小时，形成DNA含量≥4N细胞累积物。微速摄影分析显示VX-680处理的CAL-62细胞离开细胞中期。VX-680可以抑制组蛋白H3的磷酸化作用。 VX-680作用于携带T315I突变的BCR-Abl的病人样本，具有明显抑制活性。

VX-680作用于人类AML(HL-60)移植瘤模型明显降低肿瘤尺寸。VX-680按75 mg/kg剂量给药实验鼠,每天腹腔注射两次，持续13天,与对照组相比，平均肿瘤体积下降达98%。肿瘤体积比实验之前初始体积小很多。按12.5 mg/kg剂量每天给药两次，肿瘤生长也明显降低，这种作用存在剂量依赖性。VX-680耐受性很好，只有在使用高剂量时可以观察到实验动物体重稍微降低。通过比较cisplatin,按5.4 mg/kg剂量给药，每四天腹腔注射一次，一共进行三次，抑制肿瘤生长只达9%。VX-680作用于胰脏和结肠移植瘤，也引起肿瘤衰退。VX-680静脉注射给药携带HCT116肿瘤的实验鼠，显示很强的抗癌活性。使用高剂量VX-680(每小时2 mg/kg)处理，明显提高效果，比实验钱的初始肿瘤平均尺寸下降56%。