产品编号 |
产品名称 |
产品包装 |
产品价格 |
D2632-1μg |
pCMV-C-Flag |
1μg |
888.00元 |
pCMV-C-Flag是碧云天自行研发的用于在哺乳动物细胞中表达C端和Flag tag(Flag标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达;在多克隆位点的3'端含有一个可以编码Flag标签的序列,因此可以表达出含有Flag标签的融合蛋白,可以方便地使用抗Flag的抗体来识别目的蛋白,有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后,可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。
pCMV-C-Flag质粒的主要信息如下:
Feature Nucleotide
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Position
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CMV promoter
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1-602
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T3 promoter and T3 primer binding site
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620-639
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multiple cloning site
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680-740
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c-Flag tag
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741-764
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T7 promoter and T7 primer binding site
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817-838
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SV40 polyA signal
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850-1233
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f1 origin of ss-DNA replication
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1371-1675
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bla promoter
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1700-1824
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SV40 promoter
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1844-2182
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neomycin/kanamycin resistance ORF
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2217-3008
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HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal
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3009-3467
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pUC origin
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3596-4263
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pCMV-C-Flag质粒的图谱如下:
pCMV-C-Flag的多克隆位点的详细图谱如下:
XmaIPstI
|
SacI Small BamHI HindIII
|
651
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GAGCTCCACC
|
GCGGTGGCGG
|
CCGCTCTAGC
|
CCGGGCGGAT
|
CCAAGCTTCT
|
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CTCGAGGTGG
|
CGCCACCGCC
|
GGCGAGATCG
|
GGCCCGCCTA
|
GGTTCGAAGA
|
Flag
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EcoRI EcoRV SacI BglII XhoI XbaI
|
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701
|
GCAGGAATTC
|
GATATCGTCG
|
ACAGATCTCT
|
CGAGTCTAGA
|
|
|
|
CGTCCTTAAG
|
CTATAGCAGC
|
TGTCTAGAGA
|
GCTCAGATCT
|
|
|
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|
D D D K ApaI
|
751
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ATGACGACGA
|
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CCCGGTACCT
|
TAATTAATTA
|
AGGTACCAGG
|
|
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TACTGCTGCT
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GGGCCATGGA
|
ATTAATTAAT
|
TCCATGGTCC
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pCMV-C-Flag中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-C-Flag)包括:
Afl II
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Age I
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Ahd I
|
Asc I
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Bbs I
|
Bbv II
|
Blp I
|
Bsg I
|
BsiW I
|
BsmB I
|
BspM II
|
BsrG I
|
BssH II
|
Bst1107 I
|
BstE II
|
Ear I
|
Eco47 III
|
Eco72 I
|
EcoN I
|
Esp I
|
Fse I
|
Nru I
|
PflM I
|
Pme I
|
Pml I
|
PpuM I
|
Psp1406 I
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Sap I
|
Sca I
|
Spe I
|
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pCMV-C-Flag中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-C-Flag once)包括:
Nde I
|
CA`TA,TG
|
241
|
|
Pvu I
|
CG,AT`CG
|
851
|
SnaB I
|
TAC|GTA
|
347
|
|
Bcl I
|
T`GATC,A
|
1005
|
Nhe I
|
G`CTAG,C
|
598
|
|
Mun I
|
C`AATT,G
|
1098
|
Sac I
|
G,AGCT`C
|
656
|
|
Hpa I
|
GTT|AAC
|
1111
|
Sac II
|
CC,GC`GG
|
663
|
|
Mlu I
|
A`CGCG,T
|
1234
|
BstX I
|
CCAN,NNNN`NTGG
|
664
|
|
Dra III
|
CAC,NNN`GTG
|
1464
|
Not I
|
GC`GGCC,GC
|
669
|
|
Sfi I
|
GGCCN,NNN`NGGCC
|
2121
|
PspA I
|
C`CCGG,G
|
681
|
|
BseR I
|
GAGGAG 16/14
|
2164
|
Xma I
|
C`CCGG,G
|
681
|
|
Stu I
|
AGG|CCT
|
2167
|
Srf I
|
GCCC|GGGC
|
683
|
|
Cla I
|
AT`CG,AT
|
2186
|
Sma I
|
CCC|GGG
|
683
|
|
Kas I
|
G`GCGC,C
|
2345
|
BamH I
|
G`GATC,C
|
688
|
|
Nar I
|
GG`CG,CC
|
2346
|
HinD III
|
A`AGCT,T
|
694
|
|
Ehe I
|
GGC|GCC
|
2347
|
Pst I
|
C,TGCA`G
|
704
|
|
Bbe I
|
G,GCGC`C
|
2349
|
EcoR I
|
G`AATT,C
|
706
|
|
Msc I
|
TGG|CCA
|
2428
|
EcoR V
|
GAT|ATC
|
714
|
|
Tth111 I
|
GACN`N,NGTC
|
2464
|
Sal I
|
G`TCGA,C
|
718
|
|
BsrD I
|
GCAATG, 8
|
2579
|
Acc I
|
GT`MK,AC
|
719
|
|
Bsp1286 I
|
G,DGCH`C
|
2649
|
Bgl II
|
A`GATC,T
|
724
|
|
Rsr II
|
CG`GWC,CG
|
2862
|
PaeR7 I
|
C`TCGA,G
|
730
|
|
BsiC I
|
TT`CG,AA
|
3028
|
Xho I
|
C`TCGA,G
|
730
|
|
BstB I
|
TT`CG,AA
|
3028
|
Xba I
|
T`CTAG,A
|
736
|
|
Bsa I
|
GGTCTC 7/11
|
3335
|
Bsp120 I
|
G`GGCC,C
|
769
|
|
HgiE II
|
ACCNNNNNNGGT-1/13
|
3675
|
Apa I
|
G,GGCC`C
|
773
|
|
ApaL I
|
G`TGCA,C
|
3950
|
pCMV-C-Flag质粒中对于插入片段进行测序时,推荐使用的正向测序引物T3和反向测序引物T7的序列如下:
T3 primer(620-639): 5′AATTAACCCTCACTAAAGGG 3′
T7 primer(817-838): 5′GTAATACGACTCACTATAGGGC 3′
pCMV-C-Flag的全序列信息: D2632 pCMV-C-Flag-seq.txt
包装清单:
产品编号
|
产品名称
|
包装
|
D2632-1μg
|
pCMV-C-Flag
|
1μg
|
D2632-100μg
|
pCMV-C-Flag
|
100μg
|
—
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说明书
|
1份
|
保存条件:
-20℃保存。
注意事项:
本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。