蟾毒它灵471-95-4

蟾毒它灵：一种从多种植物来源中提取得到的天然产物，具有抗菌、抗病毒、抗炎及抗氧化等多种生物活性。

中文名称： 蟾毒它灵
英文名称:Bufotaline

储存条件:﹣20℃

结构类型:N/A

来源:-

分析方法: HPLC-DAD or/and HPLC-ELSD

鉴定方法: 质谱（Mass）, 核磁（NMR）

有效期：２年

分子式：C26H36O6

分子量:444.56

贮存条件：4℃冷藏、密封、避光
理化性质：

外观：白色鳞片状结晶，微溶于水

密度：0.92±0.03 g/cm³

沸点：180‑185 ℃（常压）

闪点：210±22 ℃

折射率：1.545

溶解性：溶于乙醇、甲醇、DMSO、乙酸乙酯；微溶于水

稳定性：常温稳定；避免高温；对氧化剂敏感
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实验操作方法：

1. 母液配制

精密称取蟾毒它灵粉末，细胞级DMSO配制成20 mg/mL储存母液；充分涡旋，必要时短暂超声助溶；分装避光冻存于-20℃；避免反复冻融。

2. 工作液稀释

临用实验现配，用完全培养基梯度稀释母液；严格控制DMSO终浓度≤0.1%；溶剂对照组加入0.1% DMSO；推荐预实验浓度梯度：10、20、40、80 μM。

3. 细胞准备

取对数生长期PC-12大鼠嗜铬细胞瘤细胞，细胞活力＞90%；PBS洗涤1次，300g离心5min；调整细胞密度至适当浓度。

4. 细胞毒性预实验

96孔板，每孔100μL细胞悬液；设置空白、溶剂对照、系列给药组，3-6复孔；37℃、5% CO₂孵育24h；进行MTT法检测，570 nm测OD值；筛选细胞存活率＞85%的无毒浓度区间用于后续功能实验。

5. 指标检测

采用MTT法进行细胞增殖检测，570 nm测OD值。

6. 数据计算与统计

采用非线性回归分析浓度-效应关系，GraphPad Prism拟合IC50值。