Chymotrypsin 蛋白酶 质谱级/胰凝乳蛋白酶/糜蛋白酶

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朱凯15810267201（手机微信）

胰凝乳蛋白酶是一种丝氨酸内蛋白酶，可特异性酶切Tyr，Phe，Trp和Leu的C- 末端的肽键。 也有少量的Met，Ala，Asp和Glu的C-末

端的肽键裂解。其中的残留胰蛋白酶用TLCK灭活后纯化处理。该蛋白酶用Ca2+离子激活并稳定。

物理形态: 质谱级α -Chymotrypsin蛋白酶是冻干粉

分子量:25kDa.

溶解液：建议使用1mM盐酸(含2uM CaCl2) 100ul复溶

储存条件：冻干粉存储在-20℃冰箱；溶解的酶储存在-20℃有效期1周。

保质期：冻干粉在-20℃稳定期12个月

pH 范围: 在PH=7.8时， Chymotrypsin蛋白酶具有活性

适用范围：Chymotrypsin蛋白酶特异性水解变性后蛋白质Y, F, W和L位。

溶液酶解SOP:

胰凝乳蛋白酶按照1:50 蛋白和蛋白酶的量(w/w)使用,在30°C下于100 mM含10 mM CaCl2，pH 7.8的Tris HCl中进行酶切消化2-12小时。

温馨提示：

1. 水浴温度高于37°C时蛋白酶会自我水解

2. 样品消化过程中尿素和盐酸胍的浓度最好小于1M

质量控制｜Quality Control

纯度： 液相色谱280nm检测杂质蛋白质峰强度，α -Chymotrypsin蛋白酶峰强度大于99.0%

专一性：HSA人血清白蛋白样品，ESI-MS/MS质谱分析Y, F, W和L端的专一性大于95.0%

活性: 40u/mg; 单位定义：在pH 7.8和25°C下,每分钟胰凝乳蛋白酶水解1.0μmol BTEE蛋白的量

Maldi TOF质谱检测: 纯化后的蛋白酶使用基质激光解析质谱分析未见杂质蛋白质峰

LC-MS/MS 质谱分析: 使用Chymotrypsin酶切Bevazumab,酶切条件:30℃,2小时,液质QE联用分析