小鼠Total GLP-1elisa试剂盒

检测目标

小鼠血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清等样本中的胰高血糖素样肽1（Total GLP-1），适用于定量分析。

检测原理

双抗体夹心酶联免疫吸附法（Sandwich ELISA）：

微孔板预包被小鼠GLP-1捕获抗体；

加入样本或标准品，GLP-1与捕获抗体结合；

加入HRP标记的检测抗体，形成“抗体-抗原-酶标抗体”复合物；

洗涤后加底物TMB显色，颜色深度与GLP-1浓度正相关；

450nm波长下测定OD值，通过标准曲线计算浓度。

样本处理要求

血清：无热原/内毒素试管收集血液，避免细胞刺激，3000rpm离心10分钟分离血清。

血浆：EDTA/柠檬酸盐/肝素抗凝，3000rpm离心30分钟取上清。

细胞上清：3000rpm离心10分钟去除颗粒物。

组织匀浆：生理盐水匀浆后，3000rpm离心10分钟取上清。

注意：样本需分装保存于-20℃或-80℃，避免反复冻融。

试剂盒组成（以96孔配置为例）

| 组件 | 数量 | 保存条件 |

| 预包被抗体微孔板 | 1块 | 2-8℃（干燥） |

| GLP-1标准品 | 1套 | -20℃ |

| HRP标记检测抗体 | 1瓶 | -20℃ |

| TMB显色底物 | 1瓶 | 避光2-8℃ |

| 终止液 | 1瓶 | 2-8℃ |

| 浓缩洗涤缓冲液 | 1瓶 | 2-8℃（稀释后）|

| 封板膜 | 2片 | 室温 |

| 说明书 | 1份 | 室温 |

提示：实际组分可能因品牌差异调整，请以试剂盒内清单为准。

实验流程

准备：试剂平衡至室温，配制洗涤液。

加样：每孔依次加入标准品/样本（100μl）。

孵育：37℃温育1小时，洗板5次。

加检测抗体：每孔加HRP抗体（100μl），37℃孵育30分钟，洗板5次。

显色：加TMB底物（90μl/孔），避光显色15-20分钟。

终止：加终止液（50μl/孔），5分钟内测定OD值（450nm）。

注意事项

适用性：仅限科研用途，不用于临床诊断。

样本要求：避免溶血、脂血或反复冻融，否则影响准确性。

标准曲线：每次实验需重新绘制。

干扰物：样本中勿添加叠氮钠（抑制HRP活性）。

公司正在出售的产品