大鼠Total GLP-1elisa试剂盒 新品

大鼠Total GLP-1elisa试剂盒

产品简介:

1. 检测原理

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法，可同时检测活性GLP-1（7-36 amide）和失活GLP-1（9-36 amide），特异性识别GLP-1的N端和C端表位。微孔板预包被抗GLP-1单克隆抗体，样本中的GLP-1与抗体结合后，加入酶标二抗形成复合物，通过TMB显色系统定量检测。

2. 试剂盒组成

组分  规格  保存条件

预包被微孔板  96孔  2-8℃（干燥）

GLP-1标准品  0-200 pM  -20℃（冻干）

酶标二抗  120 μL  -20℃

DPP-IV抑制剂  1 mL  -20℃

TMB底物  10 mL  2-8℃（避光）

终止液  10 mL  室温

血浆预处理液  10 mL  -20℃

3. 技术参数

检测范围：2-200 pM（0.6-60 pmol/L）

灵敏度：0.5 pM（0.15 pmol/L）

样本类型：血浆（EDTA抗凝）、肠组织匀浆

检测时间：4.5小时（含样本预处理）

交叉反应：

100% GLP-1（7-36 amide）

100% GLP-1（9-36 amide）

<0.1% GLP-2、GLP-2、GIP

4. 样本采集与处理

血浆采集：

使用含DPP-IV抑制剂（试剂盒提供）的EDTA管采集

立即冰浴，4℃ 1000×g离心10分钟

分装后-80℃保存（避免反复冻融）

组织处理：

肠组织（回肠末端）按1:9（w/v）加入酸性乙醇提取液

4℃匀浆后离心（12000×g，15分钟）

取上清立即检测或-80℃保存

5. 实验步骤

样本预处理（血浆）：

加入预处理液（1:1体积比）

4℃孵育30分钟

12000×g离心15分钟

标准品复溶：

用标准品稀释液配制0、2、5、10、20、50、100、200 pM梯度

检测流程：

加样100 μL/孔（标准品/样本）

4℃过夜孵育（16-20小时）

洗板6次

加酶标二抗（100 μL/孔）

室温孵育2小时

TMB显色（精确控制20分钟）

终止反应后立即检测（450nm/630nm）

6. 应用领域

糖尿病研究：GLP-1分泌动态监测

减重手术研究：胃肠激素变化评估

肠道内分泌研究：L细胞功能分析

GLP-1类似药物：药效学评价

高脂血症样本需超速离心处理

应用与服务

该试剂盒广泛应用于生物医学研究领域，如机制研究、疾病标志物检测等。部分厂家提供免费代测服务和专业技术支持，方便用户获得准确可靠的实验结果。

操作要点：

需严格遵守试剂盒说明书操作，建议做复孔及标准曲线。

洗涤过程至关重要，洗涤不充分会影响结果准确性。

所有试剂使用前需恢复至室温，避免批号混用。

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如何验证试剂盒的特异性？（实操建议）：

稀释线性实验 (Linearity)：

操作： 将高浓度的阳性样本用稀释液进行梯度稀释（如1:2, 1:4, 1:8...）。

预期： 测得的浓度值与稀释倍数应呈良好的线性关系（相关系数 R² ≥ 0.98）。如果线性不好，说明样本基质中有干扰物影响了特异性结合。

干扰实验 (Interference Test)：

操作： 在已知浓度的目标抗原溶液中，加入高浓度的潜在干扰物（如高浓度的脂质或结构类似物），检测其对结果的影响。

预期： 若检测值与理论值偏差在±10%以内，说明抗干扰能力强，特异性好。

回收实验 (Recovery Test)：

操作： 在样本中加入已知量的标准品，检测总含量，计算回收率。

预期： 回收率在80%-120%之间，说明试剂盒能准确识别目标，不受样本背景干扰。

注意事项

试剂盒组分应按说明储存，使用前平衡至室温。

实验中需避免交叉污染，建议使用一次性吸头。

充分混匀对实验结果至关重要。

试剂盒仅供研究使用，不可用于临床诊断。

显色液需避光保存，终止液为2M硫酸，操作时需安全防护。