蟾毒灵，465-21-4，萃园自制中药标准品对照品;实验科研级;≥98%以上

蟾蜍灵对 K562/VCR 长春新碱耐药白血病细胞系多药耐药的逆转作用。

探讨 Bufalin 对人白血病细胞系 K562/VCR 中长春新碱获得性多药耐药 （MDR） 的逆转作用。
方法和结果：
通过甲基噻唑基四唑测定法测定蟾牛素的增殖抑制率和逆转指数 （RI）。流式细胞术 （FCM） 测定 K562/VCR 细胞中阿霉素 （ADM） 的摄取、细胞周期和细胞凋亡率。用 Wright-Giemsa 染色观察到细胞形态学变化。免疫细胞化学检测 P-glycoprotein （P-gp） 、多药相关蛋白-1 （MRP1） 、 Bcl-xL 和 Bax 蛋白的表达。人白血病多重耐药 K562/VCR 细胞对 Bufalin 无交叉耐药性。Bufalin 在 0.0002 、 0.001 和 0.005 μmol/L 浓度下的 RI 分别为 4.85 、 6.94 和 14.77。0.001 μmol/L Bufalin 预孵育 2 h 可使细胞内 ADM 荧光强度提高至 28.07% （P < 0.05） 并同时下调 MRP1 表达，但对 P-gp 蛋白无显著影响。细胞周期分析显示 Bufalin 处理后细胞凋亡率增加和 G2/M 期比例明显降低。当暴露于 0.01 μmol/L 蟾蜍灵时，可观察到细胞凋亡的典型形态学变化。免疫细胞化学可检测 K562/VCR 细胞中 Bcl-xL 的下调和 Bax 表达的上调。
结论：
Bufalin 可部分逆转 K562/VCR 细胞的 MDR，可能通过改变 Bcl-xL/Bax 比值下调 MRP1 表达和激活细胞凋亡途径。

响应蟾蜍灵素的两种不同信号通路的协同相互作用诱导人白血病 U937 细胞凋亡。

蟾蜍素是中药的一种活性成分 chan'su，可诱导人白血病 U937 细胞的典型细胞凋亡。
方法和结果：
当在没有血清的情况下用 10 （-8） M Bufalin 处理 U937 细胞时，丝裂原活化蛋白 （MAP） 激酶活性在处理开始后 6 h 显着增加，并在 12 h 内升高。在 MAP 激酶激活之前，发现 Ras、Raf-1 和 MAP 激酶激酶的活性增加，但这些酶被 Bufalin 处理瞬时激活。这些结果表明，信号从 Ras、Raf-1 和 MAP 激酶依次传递到 MAP 激酶。与这种信号转导相关，细胞中 cAMP 的浓度显着降低，表明 Raf-1 也因蛋白激酶 A 磷酸化程度的降低而被激活。事实上，用毛喉素和 3-异丁基-1-甲基黄嘌呤预处理 U937 细胞，已知它们会增加细胞中 cAMP 的浓度，随后用蟾蜍素处理导致 Raf-1 活性和 DNA 片段化降低。为了确认 MAP 激酶参与凋亡过程，在 U937 细胞中表达 MAP 激酶激酶 1 的反义 cDNA。转化体对响应 Bufalin 的 DNA 片段化和细胞死亡均具有显著抗性。
结论：
我们的研究结果表明，响应 Bufalin 的 U937 细胞中 MAP 激酶持续激活的通路是参与诱导细胞凋亡的至少信号转导通路之一。

蟾蜍素和蟾蜍素对雄激素依赖性和非依赖性前列腺癌细胞增殖的影响。

强心苷可在癌症中诱导溶瘤作用。本研究旨在评估 Bufalin 和 cinobufagin 对名为 LNCaP 、 DU145 和 PC3 的前列腺癌细胞系增殖的影响。
方法和结果：
通过 MTT 法测量细胞增殖。通过乳酸脱氢酶测定细胞毒作用。细胞内钙浓度 （[Ca（2+）]（i）） 由双波长光谱仪系统测量。进行 TUNEL 测定和流式细胞术以测量凋亡细胞的百分比。比色测定法用于测量 caspase 活性。培养 2-4 天后，Bufalin 和 cinobufagin 以 0.1、1 或 10 μM 的剂量抑制癌细胞的增殖。Bufalin 和 cinobufagin 对 DU145 和 LNCaP 细胞的细胞毒性呈剂量依赖性。培养 24 小时后，蟾蜍素或蟾蜍素增加癌细胞中的 [Ca（2+）]（i） 和细胞凋亡，以及 DU145 和 PC3 细胞中的半胱天冬酶 3 活性以及 LNCaP 细胞中的半胱天冬酶 9 活性。
结论：
Bufalin 和 cinobufagin 可能抑制与 [Ca（2+）]（i） 和细胞凋亡持续升高相关的前列腺癌细胞系的增殖。