ELISA试剂盒实验方法与要点

ELISA试剂盒的设置规范曲线样品的规范浓度规划要有一个比较大的跨度，并且要能包括你所要检测试验样品的浓度，即样品的浓度要在规范曲线浓度规划之内，包括上限和下限，而关于呈S型的规范曲线，ELISA试剂盒尽量要使试验样品的浓度在中间斜度及陡段，即曲线简直成直线的规划内。 

      使小珠在流水冲击下不断地翻滚淋洗，持续冲刷2分钟后，吸干液体，再用蒸馏水浸泡2分钟，吸干即可。浸泡式犹如盆浴，流水冲刷式则比方淋浴，其洗刷效果更为完全，且也简练、快速。已有试验标明，流水冲刷式相同也适用于微量滴定板的洗刷。洗刷时设法加大水流量或加大水压，让水流冲击板孔外表，洗刷效果更佳。

       浸泡式：吸干或甩干孔内反响液；用洗刷液过洗一遍(将洗刷液注满板孔后，即甩去)；浸泡，行将洗刷液注满板孔，放置1-2分钟，间歇摇晃，浸泡时刻不可随意缩短；吸干孔内液体。 ELISA试剂盒吸干应完全，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干；洗刷3-4次，或按说明规则。在间接法中如本底较高，可增加洗刷次数或延伸浸泡时刻。

       用倍比稀释法制造规范曲线中的规范样品浓度，这样就可以确保规范样品的浓度不会呈现较大的违反。样品的浓度等目标是根据规范曲线计算出来的，所以要把做规范曲线看作是比做正式试验还要重要的一件事，否则后边的试验效果无从谈起。做出的规范曲线相关系数因试验要求不同而有所改变，但一般来说，相关系数R至少要大于0.98， ELISA试剂盒关于有些试验，至少要0.99甚至是0.999。检测规范样品时，应按浓度递加次序进行，以削减高浓度对低浓度的影响，进步准确性。规范曲线的样品数一为7个点，但至少要确保有5个点。