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人基质金属蛋白酶9(MMP-9) 酶联免疫吸附测定试剂盒

发布人:上海双赢生物科技有限公司

发布日期:2026/5/20 15:44:30

试剂盒组成:

名称

96孔配置

48孔配置

备注

微孔酶标板

12孔×8条

12孔×4条

标准品

0.3mL*6管

0.3mL*6管

样本稀释液

6mL

3mL

检测抗体-HRP

10mL

5mL

20×洗涤缓冲液

25mL

15mL

按说明书进行稀释

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

终止液

6mL

3mL

封板膜

2张

2张

说明书

1份

1份

自封袋

1个

1个

备注:

1. 96T/48T)打开包装后请及时检查所有物品是否齐全。

2. 标准品浓度依次为:804020105、0 ng/mL

3. 经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过最大标准品浓度时,可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。

检测前准备工作:

1. 请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒,平衡至室温。

2. 从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象;放置室温,轻摇均匀,待结晶完全溶解后再配置洗涤液。可将20ml浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水稀释配置成400ml工作浓度的洗涤液,未用完的放回4℃

3. 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。。

实验原理:

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人基质金属蛋白酶9(MMP-9)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人基质金属蛋白酶9(MMP-9)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。


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操作步骤1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。2.  设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;3.  样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。 4.  除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。5.  弃去液