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羊次黄嘌呤(Hypoxanthine) ELISA试剂盒操作步骤

发布人:上海双赢生物科技有限公司

发布日期:2026/5/29 10:51:39

试剂的准备

 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

洗板方法

1.  手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。

2.  自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。

操作步骤

1.   从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.   设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;

3.   样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。

4.   除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.   弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6.   每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7.   每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

试剂盒性能

1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。

2. 灵敏度:最低检测浓度小于1.0 pmol/L

3. 检测范围:1.0 - 200 pmol/L

4. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

5. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。

6. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。

7. 有效期:6个月


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