基于 Ly6C/Ly6G 策略的小鼠脾脏髓系细胞检测剖析

发布人：上海优宁维生物科技股份有限公司

发布日期:2025/1/26 13:10:45

今日分享的文献乃是作者对众多文献实验予以总结后，于检测小鼠脾细胞髓系细胞群体时所遇共性难题的深度剖析与有效解决之道。该文献系 12 年发表，虽历时已久，然其经典价值恒在，值得当下借鉴。文中有两大创新亮点。其一，以 Ly6C/Ly6G 检测髓系分群相较 Gr-1 更具优势；其二，在检测髓系细胞时，F4/80 并非必需抗体，因其染色过程实验质量波动较大。且常用检测髓系细胞的标志物（CD11b、CD11c、F4/80、Gr-1、Ly6C 及 Ly6G）尚无标准流程。

且看作者的实验方案。先明确若干共识：在稳定状态下，小鼠淋巴组织中的巨噬细胞群被视作源于血液中的单核细胞。小鼠单核细胞分为两类，经典型（Ly6C++CD43CCR2+CD62L+CX3CR1Low）与非经典型（Ly6C-CD43+CCR2-CD62L-CX3CR1Hi）；小鼠巨噬细胞亦分两类，Ly6C（或 Gr-1）Hi 群体为经典或炎症型，Ly6C（或 Gr-1）Low - neg 群体为非经典或 “常驻” 型，且两类群体均表达 F4/80（125kd 跨膜糖蛋白）。

首要任务是确定分析的核心目标群体。

先着眼于 CK1 群体（1panel），其可细分为四个亚群：
其一，(A) Gr - 1Hi SSC Int 细胞（中性粒细胞）；
其二，(B) Gr - 1Lo - neg SSCHi 细胞（嗜酸性粒细胞）且 MHC Class II - 与 CD115 - （详见附加材料 Fig. 5）；
其三，(C) Gr - 1Lo - neg SSCLo 细胞（单核细胞 / 巨噬细胞）且 MHC Class II + /- CD115 - （以红色柱状图呈现）；
其四，(D) Gr - 1 + SSCLo 细胞（单核细胞 / 巨噬细胞）且 MHC Class II - CD115 + /- （以蓝色柱状图呈现）。

再审视作者用于对比的 CK2 群体（2panel），同样可分为四个亚群：
其一，(A) Ly6GHi CD11b + 细胞（中性粒细胞）；
其二，(B) Ly6CLo - neg Ly6G - SSCHi 细胞（嗜酸性粒细胞）且 MHC Class II - 与 CD115 - （详见附加材料 Fig. 5）；
其三，(C) Ly6CLo - neg Ly6G - SSCLo 细胞（单核细胞 / 巨噬细胞）且 MHCII + /- 和 CD115 - （以红色柱状图呈现）；
其四，(D) Ly6C + Ly6G - SSCLo 细胞（单核细胞 / 巨噬细胞）且 MHC Class II - 和 CD115 + /- （以蓝色柱状图呈现）。