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发布人:上海优宁维生物科技股份有限公司
发布日期:2025/2/20 15:11:56
Biacore T200
仪器信息
设备称谓:生物分子间相互作用分析仪
制造商信息:生产厂商为Cytiva公司
产品型号:该设备型号为Biacore T200
仪器介绍
Biacore T200系统是一个利用表面等离子共振(SPR)技术的生物分子相互作用分析平台,其通用性和无标记特性使其适用于从药物研发初期直至质量控制的全过程。该系统能够高精度地实时分析生物分子间的相互作用,提供包括动力学参数、亲和力、浓度、特异性、选择性以及热动力学数据在内的全面信息。通过直接观察分子结合过程,Biacore T200能够深入探究蛋白质、核酸等多种生物分子间的相互作用,为科学家理解这些生物分子功能和它们所参与的生物学过程提供有力支持。
在SPR实验中,一个分子(称为配体)被固定在传感器芯片表面,而另一个分子(分析物)则在流动状态下与之接触。这种流动条件下的相互作用被精确测定,并以共振单位(RU)表示,该单位与芯片表面的质量变化成正比。通过SPR实验,我们可以准确地测量出动力学结合常数(包括结合速率ka和解离速率kd)以及亲和力(KD),为生物分子相互作用的深入研究提供关键数据。
重要信息
技术参数概述
Biacore T200系统,基于先进的表面等离子体共振(SPR)技术,展现了卓越的性能特点:
工作原理:利用SPR原理进行生物分子相互作用分析。
温控范围:样品舱与分析温控均达到4至45°C,满足多种实验需求。
样品兼容性:支持多种规格的样品容器,包括7mm和16mm试剂瓶、1.5mL Eppendorf管以及96孔板和384孔板。
在线脱气:配备自动脱气功能,确保运行缓冲液无气泡干扰。
背景扣除:采用串联上下游通道设计,实现最精确的背景扣除。
样品回收:具备自动回收功能,便于后续质谱分析。
缓冲液切换:支持四种缓冲液自动切换,优化实验条件。
检测范围:折射率范围为1.33至1.40,信号响应动态范围高达1至70000RU。
基线稳定性:基线噪音低于0.03RU,确保数据准确性。
结合速率:能够检测的结合速率常数范围广泛,从10³至3×10⁹ M⁻¹S⁻¹。
功能特色详解
Biacore T200系统不仅功能强大,而且应用广泛:
特异性验证:准确确认蛋白相互作用的特异性。
全面分析:对蛋白质相互作用进行亲和力与动力学的深入分析。
蛋白质组学研究:支持蛋白质组学领域的深入研究。
活性分子筛选:筛选与靶蛋白结合的活性蛋白分子。
复杂样本分析:直接分析临床标本、组织及细胞匀浆等复杂样本。
新药研发:助力新药研发的全过程,包括初筛、先导化合物优化等。
药物筛选:针对不同药靶筛选药物分子,提高研发效率。
复合物分析:分析多分子复合物的结构和组装顺序,揭示瞬时结合作用。
主要应用方向
该系统主要聚焦于:
动力学参数:精确测量结合速率常数(ka、kd)及亲和力(KD)。
分子结合:分析大分子与小分子的结合特性。
应用领域拓展
Biacore T200系统广泛应用于多个领域:
基础生命科学:涵盖蛋白质组学、癌症研究、神经生物学、免疫学等。
药物研发:从初筛到临床前和临床试验效果评价,全程助力。
生物制剂质控:确保生物制剂的质量与安全。
食品安全:检测兽药残留、维生素含量等,保障食品安全。
实验设计注意事项
在使用Biacore T200系统进行实验时,需注意以下事项:
通道分配:每次实验使用两个通道(1和2或3和4),其中一个为参比通道(无配体),另一个为样品通道(固定配体)。
流速控制:推荐配体偶联时的流速为10µl/min。
偶联量估算:根据目标Rmax(建议为25左右)和实验条件,合理估算配体偶联量。对于蛋白分析物,将RL设置为Rmax低于150;对于小分子分析物,建议采用低密度偶联以减少干扰。
配体固定:可通过不可逆捕获或可逆捕获方式固定配体,根据实验需求灵活选择。
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