人胃成纤维细胞

人胃成纤维细胞来源于手术切除的正常胃组织的成纤维样细胞，贴壁生长，纤维连接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）免疫荧光染色为阳性，不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

胃壁一般由3层组织构成，内层是粘膜层，外层是浆膜层,中间是由平滑肌组成的肌层。成纤维细胞是结缔组织中最常见的细胞，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞的主要功能之一是合成胶原蛋白及其他细胞外基质，在组织器官纤维化过程中发挥重要作用

成纤维细胞是结缔组织中最常见的细胞，电镜下，成纤维细胞胞质内可见丰富的粗面内质网、游离核糖体和高尔基复合体，表明其具有合成和分泌蛋白质的功能。己知成纤维细胞的主要功能之一是合成胶原蛋白及其他细胞外基质，在组织器官纤维化过程中发挥重要作用。

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2.加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3.按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4.将细胞悬液按1：2比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

1:2传代 小鼠 正常胃组织 采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来 贴壁生长 长梭形细胞样，不规则细胞样