大鼠胃成纤维细胞
产品信息：
产品名称 大鼠胃成纤维细胞
组织来源 正常胃组织
种属 大鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25
英文名称 | Rat gastric fibroblasts | 规格 | 5×105 |
细胞形态 | 长梭形细胞，不规则细胞 | 货号 | P-X1559 |
细胞简介：
细胞详述
胃壁一般由 3层组织构成，内层是粘膜层，外层是浆膜层,中间是由平滑肌组成的肌层。成纤维细胞是结缔组织中常见的细胞，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞的主要功能之一是合成胶原蛋白及其他细胞外基质，在组织器官纤维化过程中发挥重要作用。
细胞特性
1)组织来源于实验动物的正常胃组织。
2)细胞鉴定：纤维连接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式：长梭形细胞，不规则细胞，贴壁培养。
推荐培养基：
我们推荐使用 Delf 原代成纤维 细胞 培养体系 作为体外培养的培养基。
产品定义：
大鼠胃成纤维细胞是存在于大鼠胃壁间质中的成纤维细胞，呈梭形。它可合成和分泌胶原蛋白、弹性蛋白等细胞外基质，维持胃壁的结构稳定性和弹性，在胃损伤修复、胃炎及胃溃疡愈合过程中可被激活，参与胃壁的重构和纤维化过程，同时可分泌细胞因子调节胃上皮细胞的功能。
细胞培养方法：
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化；
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
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原代细胞纯化与鉴定：
纯化方法：
差速贴壁法：利用不同细胞贴壁速度差异，如成纤维细胞贴壁快，上皮细胞贴壁慢，在接种后1-2小时移除未贴壁细胞，可初步分离不同细胞类型。
免疫磁珠分选法/流式细胞术：针对特定细胞表面标志物，利用特异性抗体标记细胞，通过磁珠或流式分选仪分离目标细胞，纯度可达90%以上。
鉴定手段：通过形态学观察（原代细胞形态多样，与传代细胞有差异）、免疫细胞化学染色、RT-PCR检测特异性基因表达等方法，确认目标细胞的纯度和身份。
