JeKo-1

JeKo-1细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

a）、对于JeKo-1细胞，传代可参考以下方法：

1.弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗JeKo-1细胞1-2次。

2.加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2min，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。

3.轻轻吹打JeKo-1细胞，完全脱落后吸出，在1000RPM条件下离心8-10分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。

4. 按5-6ml/瓶补加培养液，将JeKo-1细胞悬液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。

1、JeKo-1细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；

2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待JeKo-1细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；

3、用适量的冻存液重悬JeKo-1细胞，并放置于冻存管中；

4、先将JeKo-1细胞冻存管放置于-20℃1.5h，然后将其移入-80℃。