人T细胞白血病细胞

T细胞白血病（adultT-cellleukemia，ATL）是一种与人T细胞白血病病毒Ⅰ（HTLV-Ⅰ）Chemicalbook感染直接相关、发生于成人的特殊类型淋巴系统恶性克隆增殖性疾病，其病变主要发生在外周血淋巴细胞，亦可侵及骨髓。 人T细胞白血病细胞是Jurkat-FHCRC细胞株(Jurkat细胞株的衍生)的一个克隆。Jurkat细胞株来源Chemicalbook于一个14岁男孩的外周血。经佛波酯和外源凝集素或抗T3单克隆抗体(两种类型的诱导都需要)诱导后可产生大量IL-2。 1）准备RPMI-1640培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。4）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入Chemicalbook培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入250px皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）补加到6ml。第二天换液并检查细胞密度。5）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。收到细胞后首次传代推荐将细胞悬液按1：2的比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中，建议冻存一支备用，后续传代根据实际情况按1:2到1:5的比例进行。换液可通过添加几毫升新鲜培养基或离心之后去上清液，添加新培养基重悬培养。