人食道鳞状细胞癌

KYSE-30细胞来源于治疗前从64岁男性胸内中段食管切除的高分化浸润性鳞状细胞癌；由异源移植入无胸腺小鼠的肿瘤细胞建立的细胞系；在文献中被描述为可在无胸腺小鼠中异源移植，并携带CDKN2A、TP53和HRAS的突变以及cERB B、MYC和细胞周期蛋白D1的扩增。

细胞在本库通过支原体检测阴性（可供检测报告）。
细菌检测结果：阴性；真菌检测结果：阴性
细胞在本库通过STR检测无误（可供检测报告）。
STR鉴定结果：
Amelogenin: X,X
D5S818:11,11
D13S317: 9,9
D7S820: 11,11.3
D16S539: 10,12
vWA: 16,18,19
TH01: 9,9
TPOX: 9,9
CSF1PO: 10,10
D19S433: 14.2,15.2
D21S11: 28,28
D18S51: 14,14 来源于一名 64 岁日本男性在治疗前切除的中段胸内食管的高分化侵袭性食管鳞状细胞癌；细胞系由移植到无胸腺小鼠的肿瘤细胞建立；文献中描述其可在无胸腺小鼠中异种移植，并携带 p53 突变和 cERB B、MYC 和 CYCLIN D1 扩增。 食管癌细胞 人 女性 食管鳞状细胞癌 贴壁生长（Adherent） 复苏人食道鳞状细胞癌细胞：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。

将含有1 mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

人食道鳞状细胞癌细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

a、弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有细胞，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2 min（视细胞情况而定），然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心5 min，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。

c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。

64岁（64 years） 上皮样细胞，长突起单层生长；贴壁生长

人食道鳞状细胞癌细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面T25瓶为例；

a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4 min，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行细胞计数。

b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液，使细胞密度5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1mL细胞悬液，注意冻存管做好标识。

c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

肿瘤细胞 鳞状细胞癌（Squamous cell carcinoma）