人胚肺成纤维细胞

英文名称:MRC-5
CAS号:
分子式:
分子量:0
EINECS号:
Mol文件:Mol File
人胚肺成纤维细胞 结构式

人胚肺成纤维细胞 用途与合成方法

人胚肺成纤维细胞来自14周龄男性胎儿的正常肺组织,为有限细胞系该细胞,老化前能传代42到46次群体倍增。它是正常二倍体细胞系,46,XY核型。模式染色体数为46,概率为70%。

人胚肺成纤维细胞

MRC-5是二倍体细胞系用于生产疫苗包括甲型肝炎、脊髓灰质炎。MCR-5从一个14周大的白人男性胚胎的肺组织中分离出来的成纤维细胞系。该细胞老化前能传代42到46次群体倍增。 它是正常二倍体细胞系,46,XY核型。 模式染色体数为46,概率为70%。可以作为功效测试、转染宿主、杀病毒测试等。细胞引进入本库精确代数为P13代, 入库冻存5代供应。

细胞在本库通过支原体检测阴性(可供检测报告)。
细菌检测结果:阴性;真菌检测结果:阴性
细胞在本库通过STR检测无误(可供检测报告)。
STR鉴定结果:
Amelogenin: X,Y
D5S818:11,12
D13S317: 11,14
D7S820: 10,11
D16S539: 9,11
vWA: 15
TH01: 8.9
TPOX: 8
CSF1PO: 11,12
D19S433: 14,15
D21S11: 31.2
D18S51: 15,21

成纤维细胞

贴壁

1)准备MEM培养基;北美胎牛血清,10%;PS 1%。

2)人胚肺成纤维细胞培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

3)人胚肺成纤维细胞冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。液氮储存。

将含有1mL人胚肺成纤维细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查人胚肺成纤维细胞密度。 男性 1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗人胚肺成纤维细胞1-2次。

2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2ml完全培养基终止消化。

3.按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。

4.将人胚肺成纤维细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

胎儿(Fetal) 有限细胞系 正常(Normal)

人胚肺成纤维细胞可以用于P物质对人胚肺成纤维细胞作用及其机制的研究。

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