去脂胎牛血清 用途与合成方法
去脂胎牛血清是将胎牛血清进行去脂处理的去脂血清。胎牛血清营养成分完全而丰富,代谢产物极少,微生物感染的可能性最小,品质最高,是组织细胞培养和病毒增殖培养的重要营养来源。胎牛血清是常见的实验室培养基营养液,在大部分试验中是不需要对胎牛血清中的脂肪酸进行去除的,但是,在进行某些特殊细胞培养的时候为了保证实验的准确性和我们要读胎牛血清中的某些成分进行去除。
1)激素因素刺激细胞生长,增殖和分化。
2)有利于细胞依附在培养皿上。
3)蛋白的转移和结合提供足够的激素、矿物质及血脂。去脂胎牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。1)提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。2)提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。3)有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。
4)去脂胎牛血清是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。
5)起酸碱度缓冲液作用。
6)提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。
1.溶解。取适量的胎牛血清白蛋白提取物,溶解于10倍的蒸馏水中,溶解温度在23~27℃。用浓度为0.2N的HCl,调节PH至3~3.5。
2.解析。充分溶解后的溶液胎牛血清白蛋白移至冰水混合物中进行冰水浴,同时持续搅拌,维持30min。
3.吸附。加入5%的活性炭,混匀,混悬液将混悬液移至冰水混合物中进行冰水浴,同时持续搅拌,维持1小时。过滤,滤渣回收后再利用。
4.浓缩。滤液用0.2N的NaOH调节PH值至7.0,然后用20000分子量以下的超滤器进行超滤浓缩。
5.冻干。将浓缩液按冻干曲线冻干,即将超滤后的浓缩液迅速冷冻至-40℃,持续1小时左右,升到-25℃,持续10~20小时,再缓慢升温至0℃,维持1~4小时,升温至保存温度20℃,分装为成品。
胆固醇、甘油三酯和磷脂通过一种叫做脂质体的产品治疗FBS而被去除。