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Y190感受态细胞

Y190感受态细胞

中文名称:Y190感受态细胞
英文名称:Y190 competent cells
CAS号:
分子式:
分子量:0
EINECS号:
Mol文件:Mol File
Y190感受态细胞 结构式

Y190感受态细胞 用途与合成方法

Y190菌株是Clontech公司开发的GAL4系统酵母双杂实验用菌株,MATa型,可直接转化质粒或与MATα型酵母菌株Y187通过mating操作进行蛋白互作验证或筛库试验。Transformation marker为: trp1,leu2,cyh2;报告基因为: lacZ,HIS3,MEL1。Y190-GAL4酵母双杂系统需要两种质粒配套使用:(pGB和pACT2)或(pGBKT7和pGADT7)。质粒pGB由pGBKT7改造而来,筛选标志为TRP1,用于表达DNA-BD(来自酵母转录因子GAL4N端1~ 174位氨基酸)与目标蛋白(Bait)的融合蛋白;质粒pACT2与pGADT7的结构和功能类似,筛选标志为LEU,用于表达AD(GAL4 C端768~881位氨基酸)与目标蛋白 (Prey)的融合蛋白。 一个完整的酵母转录因子GAL4可分为功能上相互独立的两个结构域:位于N端1~174位氨基酸区段的DNA结合域 (DNA-BD)和位于C端768~881位氨基酸区段的转录激活域(AD)。DNA-BD能够识别GAL4-responsive gene的上游激活序列UAS,并与之结合。而AD可以启动UAS下游的基因进行转录。BD和AD单独存在不能激活转录,但当二者接近时,则呈现完整的GAL4活性,使含有UAS的启动子下游基因转录表达。正常条件下,BD不与AD结合,将要检测的蛋白质分别与BD和AD融合,形成 bait融合蛋白(bait –BD)和 prey融合蛋白 (prey-AD),如果 bait和 prey发生相互作用,就会促使 BD和 AD的相互接近,形成完整的GAL4,从而激活报告基因的转录。

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上海联迈生物工程有限公司
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中文名称:Y190感受态细胞

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Y190感受态细胞
上海联迈生物工程有限公司 2024-12-25

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