ESI-09

ESI-09是一种特定的exchange protein directly activated by cAMP (EPAC)抑制剂，其对EPAC1和EPAC2的IC50分别为3.2 μM 和1.4 μM ，比PKA高出100多倍的选择性。 ESI-09，一种新型非环状核苷酸EPAC拮抗剂，能够特异性阻断细胞内EPAC介导的Rap1活化和Akt磷酸化，以及EPAC介导的胰腺β细胞中胰岛分泌。另一方面，ESI-09不抑制AsPC1细胞中表皮生长因子(EGF)诱导的Akt磷酸化。在胰腺癌细胞中，ESI-09通过剂量依赖性降低007-AM诱导的细胞粘附而抑制细胞迁移和侵袭。 ESI-09显著降低人脐静脉内皮细胞中总细菌数。 ESI-09有效拮抗CPT-cAMP 诱导的Schwann细胞(SC)分化以及髓鞘的形成。在SC神经元培养基中，ESI-09显著降低O1阳性和MBP阳性的数量，而不影响神经元或SCs自身的健康。 ESI-09 (10 mg/kg/d, i.p.)，通过对EPAC1的药理抑制，保护WT C57BL/6小鼠免受致命的SFG立克次氏体病的损害。 ESI-09是一种特定的exchange protein directly activated by cAMP (EPAC)抑制剂，其对EPAC1和EPAC2的IC50分别为3.2 μM 和1.4 μM ，比PKA高出100多倍的选择性。

Target	Value
EPAC2 (Cell-free assay)	1.4 μM
EPAC1 (Cell-free assay)	3.2 μM

ESI-09，一种新型非环状核苷酸EPAC拮抗剂，能够特异性阻断细胞内EPAC介导的Rap1活化和Akt磷酸化，以及EPAC介导的胰腺β细胞中胰岛分泌。另一方面，ESI-09不抑制AsPC1细胞中表皮生长因子(EGF)诱导的Akt磷酸化。在胰腺癌细胞中，ESI-09通过剂量依赖性降低007-AM诱导的细胞粘附而抑制细胞迁移和侵袭。 ESI-09显著降低人脐静脉内皮细胞中总细菌数。 ESI-09有效拮抗CPT-cAMP 诱导的Schwann细胞(SC)分化以及髓鞘的形成。在SC神经元培养基中，ESI-09显著降低O1阳性和MBP阳性的数量，而不影响神经元或SCs自身的健康。

ESI-09 (10 mg/kg/d, i.p.)，通过对EPAC1的药理抑制，保护WT C57BL/6小鼠免受致命的SFG立克次氏体病的损害。

1. 在-5℃下，将3-氯苯胺（30mg，0.24mmol）溶于1mL冷却的溶剂中。 2. 向上述溶液中加入0.24mL 1N HCl（aq.），形成酸性苯胺溶液。 3. 缓慢滴加1mL亚硝酸钠（16mg，0.24mmol）的水溶液至酸性苯胺溶液中，生成芳基重氮盐溶液。 4. 向芳基重氮盐溶液中加入乙酸钠（33mg，0.4mmol），随后加入1mL粗3-(5-叔丁基异恶唑-3-基)-3-氧代丙腈（38mg，0.2mmol）的乙醇溶液。 5. 将反应混合物在0℃下搅拌5分钟，然后倒入10mL水中，并用乙酸乙酯（20mL）萃取。 6. 有机层用无水Na2SO4干燥，过滤后减压浓缩。 7. 残留物通过硅胶短柱色谱纯化，使用己烷/乙酸乙酯（2:1）作为洗脱剂，得到目标产物2-(5-(叔丁基)异恶唑-3-基)-N-(3-氯苯基)-2-氧代乙亚肼基氰化物（40mg，61%收率），为黄色固体，熔点为146-147℃。 8. HPLC分析显示产物纯度为99.6%（保留时间fR=21.72分钟）。 9. 产物的结构通过1H NMR、13C NMR和HRMS（ESI）确认。

参考文献：

[1] Tetrahedron Letters, 2013, vol. 54, # 12, p. 1546 - 1549

[2] Patent: WO2013/119931, 2013, A1. Location in patent: Paragraph 0214