gRNA文库构建的流程
gRNA文库构建基本原理是通过一段与靶标DNA相同的gRNA指导Cas9核酸酶对靶向基因进行DNA修饰，以此造成基因的功能突变或缺失。在此基础上，利用CRISPR/Cas9技术建立哺乳动物全基因组突变库或者与某类功能相关的基因突变体库，通过功能性筛选和富集以及随后的PCR扩增和深度测序分析，发掘与筛选表型相关的基因，称为CRISPR/Cas9 gRNA文库筛选。
2020-02-19
gRNA文库构建方法
CRISPR-Cas9系统是一种强大的基因组编辑工具，如风暴一般席卷了整个基因组工程领域。最近Andrea Ventura等人报道了这一系统在gRNA 文库构建方面的应用，而这样的应用往往需要同时表达一对gRNA，比如用Cas9切口酶进行大片段删除。CRISPR-Cas9是细菌在漫长的进化过程中演化出的重要防御机制。这个监控体系能够根据引导RNA（gRNA）的指示，靶标并降解入侵者的遗传物质。
2020-02-19
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