班氏试剂的应用

背景及概述^[1][2]

班氏试剂是一种络合复盐,其商品名称为枸椽酸多羟基碳酸合铜(II)酸三钠-硫酸钠六水合物,化学式为Na3[CuCO3(C6H5O7)]-Na2SO4-xNaOH-6H2O。在水溶液中不会和CO2反应,能够冷却结晶制成晶体粉末,需要时配制溶液即可使用。班氏试剂阴离子直接在碱性环境中与-CHO作用,因此反应较慢。班氏试剂只适合还原糖的鉴定。

理化性质^[1]

班氏试剂:即硫酸铜、碳酸钠和柠檬酸钠组成的混合液，又叫本尼迪克特(Benedict)试剂，配制方法为将4.3g研细的硫酸铜溶于25mL热水中，待冷却后用水稀释到40mL。另把43g柠檬酸钠及25g无水碳酸钠(若用有结晶水碳酸钠，则取量应按比例计算)溶于150mL水中，加热溶解，待溶液冷却后，再加入上面所配制的硫酸铜溶液。加水稀释到250mL。将试剂贮于试剂瓶中，瓶口用橡皮塞塞紧。班氏试剂与醛反应的结果是与斐林试剂一致的，只是比斐林试剂更稳定，可以长期保存，所以在日常化验中更常使用。该试剂加入测验溶液并煮沸，若待测溶液中有高浓度的还原糖则产生红色沉淀物，低浓度时产生黄色沉淀物。

应用^[3]

用班氏试剂鉴定还原糖时，其反应原理与斐林试剂相似，但溶液的颜色常因待测液中还原糖含量不同，而呈现黄色至砖红色等不同的颜色。

采用班氏试剂法测定粪还原糖含量，观察腹泻患者，班氏试剂法测定粪还原糖简便、快速、灵敏度高、安全、实用。较醋酸铅-氢氧化氨法安全，避免了铅中毒;较国外常用的clinitestTablet还原糖检测法成本低廉，来源广泛。在感染性腹泻的早期，用班氏试剂法测定粪还原糖，有助于LI的早期诊断，对指导治疗具有重要价值。班氏试剂测验比斐林测验更灵敏。

检测方法:取班氏试剂2ml加入粪便1ml(相当于稀便8～10滴)加热至沸，观察颜色的变化和红色沉淀的多少，以此来判定阳性程度:蓝色无沉淀(-)，绿色微量沉淀(±)，黄绿色少量沉淀(+)，浅黄色较多沉淀(++)，深黄色多量沉淀(+++)，紫红色大量沉淀(++++)。疑诊轮状病毒性肠炎者进行轮状病毒检测，疑诊细菌感染性肠炎者做细菌培养。判定标准:≥++为粪还原糖阳性。

制备^[2]

①把86.5g柠檬酸钠和50g无水碳酸钠溶解在400mL水中;②把8.65g硫酸铜加入到50mL热水中配成CuSO4溶液;③待两者冷却至室温，将硫酸铜溶液缓缓注入前液搅匀，若有沉淀滤去，加水稀释至500mL即可。班氏试剂化学性质稳定，灵敏度高，配好后可长期使用。

主要参考资料

[1] 李传美, 刘敏, 周雪典, 张娟, 章承红, & 孟文芳等. (2004). 班氏试剂测定粪还原糖的临床意义. 徐州医学院学报, 24(5), 456-458.

[2] 张卓鹏. (2012). 斐林试剂、双缩脲试剂、班氏试剂三者之比较. 新高考(高三理化生)(9), 59-62.

[3] 郭井原. (2005). 斐林试剂与班氏试剂. 生物学通报, 40(6), 56-56.